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操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
產品名稱 |
英文名稱 |
貨號 |
FcγBP人IgG-Fc片段結合蛋白elisa試劑盒說明書 |
Human Fc Fragment Of IgG Binding Protein(FcgBP)ELISA Kit |
PH103260 |
優(yōu)勢特點:產品僅用于科研
1.高效、靈敏、特異的抗體;
2.穩(wěn)定的重復性和可靠性;
3.吸附性能好,空白值低,孔低透明度高的固相載體;
4.使用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)液、尿液、唾液等等多種標本類型;
5.節(jié)省實驗經費。
組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔)
2. 標準品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標準濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內配制。
如配制50 ng/ml標準品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標準品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測稀釋液A:1×10ml/瓶。
5. 檢測稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制(100ul/孔),實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測溶液A加990ul檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內配制。
7. 檢測溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
萊苞迪甙D(標準品) Rebaudioside D 質量規(guī)格:HPLC≥95.50%,標準品 小鼠含亮酸豐富重復蛋白3C(LRRC3C)ELISA試劑盒 ,英文名: LRRC3C ELISA Kit
老鸛草素(標準品) Geraniin 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 小鼠含球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪酸激酶1(Tie-1)ELISA試劑盒 ,英文名: Tie-1 ELISA Kit
酪醇(標準品) Tyrosol 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 小鼠含球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪酸激酶2(Tie-2)ELISA試劑盒 ,英文名: Tie-2 ELISA Kit
雷酚內酯(標準品) Triptophenolide 質量規(guī)格:HPLC≥99%,標準品 小鼠含銅胺氧化酶3(AOC3)ELISA試劑盒 ,英文名: AOC3 ELISA Kit
雷公藤紅素(標準品) Celastrol 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 小鼠含血管性血友病因子A域蛋白1(vWA1)ELISA試劑盒 ,英文名: vWA1 ELISA Kit
雷公藤甲素(標準品) Triptolide 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 小鼠含血管性血友病因子A域蛋白3A(vWA3A)ELISA試劑盒 ,英文名: vWA3A ELISA Kit
雷公藤內酯酮(標準品) Triptonide 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 小鼠合成酶(NOS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
類葉升麻苷,毛蕊花糖苷(標準品) Acteoside 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 小鼠合成酶(NOS)ELISA試劑盒 ,英文名: NOS ELISA Kit
利卡靈-B(標準品) (-)-Licarin B 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 小鼠合酶運輸因子(NOSIN)ELISA試劑盒 ,英文名: NOSIN ELISA Kit
利血平(標準品) Reserpine
質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 小鼠和肽素(CPP)ELISA試劑盒 ,英文名: CPP ELISA Kit
HDLEC-c 人類皮膚管內皮細胞(HDLEC)來自成年捐獻者 500,000cells 頜下腺上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)辛卡利特 Sincalid(CCK-8)質量規(guī)格:0.97
視網膜微血管內皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)胸腺肽α1 Thymosin α1 Acetate質量規(guī)格:>98%,BR
GPA33 Others Human 人 GPA33 / Glycoprotein-A33 人細胞裂解液 (陽性對照) 奧比沙星(標準品)Orbifloxacin質量規(guī)格:含量測定
NRK 大鼠腎細胞奧比沙星 Orbifloxacin質量規(guī)格:>99%,BR
非洲綠猴腎細胞;Vero E6醋酸胸腺肽β4 Thymosin β4 Acetate質量規(guī)格:>95%,BR
血紅素氧化酶 (HO-1) 作用:
ELISA 規(guī)格: 48T/96T
進口分裝 Panaxydiol
中文名: 分子式:C17H24O2 度:%
血紅素氧化酶 英文名稱: heme oxygenase-1 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: HO-1 Palmitone 中文名:棕櫚酮 分子式:C31H62O 度:98.0%
血紅蛋白檢測 (Mg) test case (machine, manual) Oxytetracycline 中文名:鹽酸土霉素 分子式:C22H25ClN2O9 度:98.0%
性血友病因子裂解酶 英文名稱: von Willebrand factor-clea-ving protease 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: vWF-cp /ADAMTS13 Androstadienedione 897-06-3 中文名:1,4-雄烯二酮 分子式:C19H24O2
生長素 英文名稱:
Angiogenin 英文縮寫: ANG 規(guī)格: 48T/96T
Oxymetholone 中文名:康復龍 分子式:C21H32O3 度:98.0%
注意事項:
1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3. 各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5 分鐘內,如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD 值大于標準品孔孔的OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物請避光保存。
7. 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9. 本試劑不同批號組分不得混用。
FcγBP人IgG-Fc片段結合蛋白elisa試劑盒說明書服務:
我們可以根據您的應用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。