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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:NCI-H446 細胞

  • 產(chǎn)品型號: BH-0110201
  • 產(chǎn)品**:派瑞曼
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
NCI-H446 細胞來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實驗室,可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實驗服務(wù)。
詳情介紹:

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據(jù)實際進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學科領(lǐng)域較為寬廣,如細胞學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等; 
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟
可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學性狀相似的實驗對象。

產(chǎn)品名稱

NCI-H446 細胞

規(guī)格

T25

貨號

BH-0110201

產(chǎn)品詳細 小細胞肺癌細胞;NCI-H446
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁/懸浮生長,混合
特征特性 該細胞是1982年由CarneyD和GazdarAF等從一位小細胞肺癌患者的胸腔積液中建立的。細胞的原始形態(tài)并不具有小細胞肺癌特征。這個細胞株是小細胞肺癌的生化和形態(tài)學上的變種,表達神經(jīng)元特有的烯醇酶和腦型肌酸激酶同工酶;多巴脫羧酶、蠶素、抗**、催產(chǎn)素或胃泌釋
培養(yǎng)條件 RPMI1640+10%FBS
傳代方法 1:2傳代
細胞生物學研究有以下幾個方面。產(chǎn)品僅用于科學研究
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括。
①細胞核、染色體以及基因表達的研究。
②生物膜與細胞器的研究。
③細胞骨架體系的研究。
④細胞增殖及其調(diào)控。
⑤細胞分化及其調(diào)控。
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)。
⑦細胞的起源與進化。
⑧細胞工程。

實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
    1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;
    2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
    3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織完全被消化;
    4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
    5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、熒光鑒定:
    1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
    2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
    3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
    4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
    5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
    6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

培養(yǎng)操作:
1)復(fù)蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。      
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。 
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
Human plasminogen / plasmin (PL/Fbn) ELISA Kit 人纖溶酶/纖維蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA試劑盒  1-Methyl-L-4,5-dihydroorotic acid  中文名:1-甲基-L-4,5-二氫乳清酸  分子式:C6H8N2O4 

Human plasminogen (Plg) ELISA Kit 人纖溶酶原(Plg)ELISA試劑盒  1-chloro-6-(5-ethynylthiophen-2-yl)hexa-3,5-diyn-2-ol
坎地沙坦酯(標準品)  Candesartan cilexetil  質(zhì)量規(guī)格:UV法含量測定 英文名稱RatPGFElisakit大鼠前列腺素F型(PGF)規(guī)格:96T/48T

鹽酸坦洛新(標準品)  Tamsulosin    質(zhì)量規(guī)格:含量測定 活體細胞半胱氨酸蛋白酶-7(CASPASE-7)活性原位熒光染色檢測試劑盒20

托芬那酸(標準品)  N-(3-Chloro-ortho-tolyl) anthranilic acid  質(zhì)量規(guī)格:UV法含量測定 ELISAKitFSP人纖維母細胞表面抗原規(guī)格:48T/96T

甲鈷胺(標準品)  Mecobalamin  質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測定 小鼠干擾素β(IFNβ)ELISA試劑盒 ,英文名: IFNβ ELISA Kit

單白前苷B  Vincetoxicoside B  質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標準品 人血清白蛋白(HSA)ELISA檢測試劑盒Humansreumalbumin,HSAELISAKit 96T/48T

單硝酸異山梨酯  Isosorbide 5-mononitrate  質(zhì)量規(guī)格:含量測定 大鼠神經(jīng)肽Y(NPY)試劑盒 Rat neuropeptide Y,NPY ELISA kit

單硝酸異山梨酯  Isosorbide 5-mononitrate  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 英文名稱RatPGE1ELISAKit大鼠前列腺素E1(PGE1)規(guī)格:96T/48T

2-單硝酸異山梨酯(標準品)  Isosorbide 2-nitrate  質(zhì)量規(guī)格:檢查用 活體細胞半胱氨酸蛋白酶-8(CASPASE-8)活性原位熒光染色檢測試劑盒20

NCI-H446 細胞依那普利雙酮(標準品)  XX  質(zhì)量規(guī)格:檢查用 ELISAKitFRA人纖維連接素相關(guān)抗原規(guī)格:48T/96T

依那普利拉(標準品)  Enalaprilat  質(zhì)量規(guī)格:檢查用 小鼠干擾素α(IFNα)ELISA試劑盒 ,英文名: IFNα ELISA Kit
人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A(CYPA)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 別稱:PPIA, CYPH, Peptidylprolyl Isomerase A, Rotamase A Human CYPA(Cyclophilin A) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清,血漿或其他生物體液中天然及部分重組CYPA濃度


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