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產(chǎn)品規(guī)格:>5×105細胞數(shù)
包裝規(guī)格:1ml凍存細胞懸液或T-25培養(yǎng)瓶
產(chǎn)品名稱 |
人脾星狀細胞 |
英文名稱 |
Primary human splenic stellate cells |
產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
貨號 |
P-X1452 |
公司所有產(chǎn)品均不得用于臨床診斷,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細胞介紹:
脾是重要的器官,有造血、濾血、衰老血細胞及參與反應等功能。也是細胞遷移和接受抗原刺激后發(fā)生應到、產(chǎn)生效應分子的重要場所。
1)細胞來源于人正常腎臟組織。
我們推薦使用 Delf 原代星狀細胞 培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
注意事項:
1)原代培養(yǎng)的分離細胞在初次接觸體外環(huán)境時,雖然被分散成單個細胞,但它們之間的互相影響還是存在的, 而且這種影響對細胞能否存活是非常重要的。在這些細胞之間能產(chǎn)生一些促生長的活性物質(zhì), 使細胞彼此互相促進存活和生長。如果接種的細胞密度過低, 細胞之間的促生長作用很小, 雖然營養(yǎng)物質(zhì)很充足, 也很難使細胞適應從體內(nèi)的組織環(huán)境到被分散后進入獨立生存環(huán)境的變化過程。 如果接種的細胞密度過大,會導致營養(yǎng)物質(zhì)供應不足, 代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代。
在脾臟纖維化過程中,其被多種病理因子激活,分泌多種細胞外基質(zhì),包括膠原、啟動和促進了纖維化這一病理過程。正常情況下,脾臟星狀細胞處于非激活的靜止期狀態(tài),球形。當脾臟受損傷或者受到細胞生長因子等刺激后轉(zhuǎn)變?yōu)榧せ顮顟B(tài)。
2)細胞鑒定:結蛋白(Desmin)免yi熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細jun、酵母和真jun。
5)細胞生長方式:長梭狀、星狀細胞,貼壁培養(yǎng)。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
2)原代培養(yǎng)時初始培養(yǎng)在組織分散和分離細胞時細胞可能會受到嚴重的損傷。適當增大原代培養(yǎng)接種的細胞密度, 給培養(yǎng)的細胞提供更多的類似于在體內(nèi)時細胞之間的相互作用, 會極大提高原代培養(yǎng)的細胞在體外存活率。待細胞適應體外環(huán)境后進行傳代培養(yǎng)時再以較低的密度接種和培養(yǎng)。
3)由于細胞之間的相互的內(nèi)在聯(lián)系被打破,分離細胞在體外培養(yǎng)時經(jīng)歷的生存環(huán)境改變很大,在體外存活和生長的難度相應增加。 對于貼壁依賴性細胞來說,盡快使接種的細胞貼壁,是決定培養(yǎng)能否成功的關鍵。可以在接種后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 3h 到 5h,由于細胞懸液中帶有少量培養(yǎng)液, 細胞即可以維持存活, 又可以很快接觸到培養(yǎng)瓶底壁, 是細胞迅速黏附于底物,待細胞貼壁后,再補足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
3、分離細胞培養(yǎng)法—懸浮型細胞培養(yǎng) 。
操作步驟如下:
1、剪切組織:先將所取得的組織,用D-Hanks或Hanks液清洗,以去除表面血污,并用手術鑷去除黏附的結締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后,用手術刀將組織切成若干小塊,移入青霉素小瓶或小燒杯中,加入適量緩沖液,用彎頭眼科剪,反復剪切組織,直到組織成糊狀,約1mm3大小。靜置片刻后,用吸管吸去上層液體,加入適當?shù)木彌_液再清洗一次。
2、消化分離:消化分離的目的是將細小的組織塊消化分離成細胞團或分散的單個細胞,以利于進一步的培養(yǎng),常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3、培養(yǎng):細胞懸液用計數(shù)板進行細胞計數(shù)。用培養(yǎng)液將細胞數(shù)調(diào)整為(2~5)×105 cells/ml,或?qū)嶒炈杳芏?,分裝于培養(yǎng)瓶中,使細胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內(nèi),5%CO2,37℃靜置培養(yǎng)。一般3~5d,原代培養(yǎng)細胞可以黏附于瓶壁,并伸展開始生長,可補加原培養(yǎng)液量1/2的新培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)2~3d后換液,一般7~14d可以長滿瓶壁,進行傳代。
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R2C睪丸間質(zhì)細胞腺瘤 |
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人肺腺癌細胞LTEP-α-2(STR鑒定正確) |
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昆蟲卵巢細胞Sf9(種屬鑒定) |
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phospho-SHC1 (Tyr349) Antibody Blocking Peptide |
人急性淋ba母細胞白血病細胞MT-4(STR鑒定正確) |
人卵巢畸胎瘤細胞PA-1(STR鑒定正確) |
KRT35 Antibody Blocking Peptide |
大鼠皮膚成纖維細胞 |
人胰腺癌細胞HPAF-II(STR鑒定正確) |
NOSTRIN Antibody Blocking Peptide |
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人腎上腺皮質(zhì)小細胞癌細胞SW-13(STR鑒定正確) |
MAP3K9 Antibody Blocking Peptide |
豬鼻甲黏膜成纖維細胞PTK75(種屬鑒定) |
人舌磷癌細胞CAL33(STR鑒定正確) |
PDLIM3/ALP Antibody Blocking Peptide |
人胃腺癌細胞(低分化)BGC-823(STR鑒定正確) |
人咽鱗癌細胞FaDu(STR鑒定正確) |
AACT (Native) |
人黑素瘤細胞WM-266-4(STR鑒定正確) |
小鼠乳腺上皮細胞HC11(種屬鑒定) |
人脾星狀細胞C8orf74 Antibody Blocking Peptide |