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產品詳情
  • 產品名稱:小鼠角質形成細胞

  • 產品型號:P-X1902
  • 產品**:派瑞曼
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簡單介紹:
小鼠角質形成細胞正在出售的產品:OS-RC-2(STR鑒定正確)小鼠結腸癌帶紅色熒光MC-38+RFP(種屬鑒定)人肺腺癌細胞Calu-1(STR鑒定正確)人T淋ba瘤細胞H9(STR鑒定正確)人結直腸癌氟尿嘧啶耐藥株HCT-15+5FU(STR鑒定正確)人胰腺癌細胞
詳情介紹:

公司所有產品均不得用于臨床診斷,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。

產品名稱

小鼠角質形成細胞

英文名稱

Mouse primary keratinocytes

產品規(guī)格

5×105

貨號

P-X1902

產品規(guī)格:>5×105細胞數
包裝規(guī)格:1ml凍存細胞懸液或T-25培養(yǎng)瓶

細胞介紹:

角質形成細胞是一種不斷分化的復層鱗狀上皮細胞,其分化的終階是形成角蛋白。根據角質形成細胞的發(fā)展階段和特點,從內向外可將其分為五層。基底細胞層又稱層,棘細胞層,顆粒層,透明層,角質層。
角質形成細胞的分化成熟表現為從基底層到向角質層的逐漸移行。在單一移行過程中,角質形成 ;細胞的形狀和功能也逐漸發(fā)生著變化,從單層柱狀上皮的基底層到扁平的細胞核消失的角質層。新生的基底細胞進入棘細胞層,然后上移到顆粒層的上層。

細胞特性:

1)細胞來源于實驗動物的正常皮膚組織。
2)細胞鑒定:廣譜角蛋白((Pan Cytokeratin)免yi熒光染色為陽性。
3)經鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細jun、酵母和真jun。
5)細胞生長方式:上皮樣細胞,貼壁培養(yǎng)。

推薦培養(yǎng)基:

推薦使用 DELF原代 角質形成 細胞培養(yǎng)體系 作為該細胞的培養(yǎng)基。

操作步驟如下:

1、剪切組織:先將所取得的組織,用D-Hanks或Hanks液清洗,以去除表面血污,并用手術鑷去除黏附的結締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后,用手術刀將組織切成若干小塊,移入青霉素小瓶或小燒杯中,加入適量緩沖液,用彎頭眼科剪,反復剪切組織,直到組織成糊狀,約1mm3大小。靜置片刻后,用吸管吸去上層液體,加入適當的緩沖液再清洗一次。
2、消化分離:消化分離的目的是將細小的組織塊消化分離成細胞團或分散的單個細胞,以利于進一步的培養(yǎng),常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3、培養(yǎng):細胞懸液用計數板進行細胞計數。用培養(yǎng)液將細胞數調整為(2~5)×105 cells/ml,或實驗所需密度,分裝于培養(yǎng)瓶中,使細胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內,5%CO2,37℃靜置培養(yǎng)。一般3~5d,原代培養(yǎng)細胞可以黏附于瓶壁,并伸展開始生長,可補加原培養(yǎng)液量1/2的新培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)2~3d后換液,一般7~14d可以長滿瓶壁,進行傳代。

產品的運輸和保存:

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。

注意事項:

1)原代培養(yǎng)的分離細胞在初次接觸體外環(huán)境時,雖然被分散成單個細胞,但它們之間的互相影響還是存在的, 而且這種影響對細胞能否存活是非常重要的。在這些細胞之間能產生一些促生長的活性物質, 使細胞彼此互相促進存活和生長。如果接種的細胞密度過低, 細胞之間的促生長作用很小, 雖然營養(yǎng)物質很充足, 也很難使細胞適應從體內的組織環(huán)境到被分散后進入獨立生存環(huán)境的變化過程。 如果接種的細胞密度過大,會導致營養(yǎng)物質供應不足, 代謝廢物積累較快需要經常換液和傳代。
2)原代培養(yǎng)時初始培養(yǎng)在組織分散和分離細胞時細胞可能會受到嚴重的損傷。適當增大原代培養(yǎng)接種的細胞密度, 給培養(yǎng)的細胞提供更多的類似于在體內時細胞之間的相互作用, 會極大提高原代培養(yǎng)的細胞在體外存活率。待細胞適應體外環(huán)境后進行傳代培養(yǎng)時再以較低的密度接種和培養(yǎng)。
3)由于細胞之間的相互的內在聯系被打破,分離細胞在體外培養(yǎng)時經歷的生存環(huán)境改變很大,在體外存活和生長的難度相應增加。 對于貼壁依賴性細胞來說,盡快使接種的細胞貼壁,是決定培養(yǎng)能否成功的關鍵??梢栽诮臃N后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內培養(yǎng) 3h 到 5h,由于細胞懸液中帶有少量培養(yǎng)液, 細胞即可以維持存活, 又可以很快接觸到培養(yǎng)瓶底壁, 是細胞迅速黏附于底物,待細胞貼壁后,再補足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
3、分離細胞培養(yǎng)法—懸浮型細胞培養(yǎng) 。


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