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公司所有產(chǎn)品均不得用于臨床診斷,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
產(chǎn)品名稱(chēng) |
小鼠結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞 |
英文名稱(chēng) |
Mouse primary colon mucosal epithelial cells |
產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
貨號(hào) |
P-X1809 |
產(chǎn)品規(guī)格:>5×105細(xì)胞數(shù)
包裝規(guī)格:1ml凍存細(xì)胞懸液或T-25培養(yǎng)瓶
細(xì)胞介紹:
結(jié)腸在右髂窩內(nèi)續(xù)于盲腸,在第 3骶椎平面連接直腸。結(jié)腸分升結(jié)腸、橫結(jié)腸、降結(jié)腸和乙狀結(jié)腸4部,大部分固定于腹后壁,結(jié)腸的排列酷似英文字母M,將小腸包圍在內(nèi)。結(jié)腸橫切面由內(nèi)到外依次為:粘膜(上皮層,固有層,粘膜肌層),粘膜下層,肌層,外膜。結(jié)腸黏膜上皮在環(huán)境或遺傳等多種致癌因素作用下導(dǎo)致結(jié)腸癌,是常見(jiàn)的惡性腫瘤之一。因此,體外培養(yǎng)結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞為研究進(jìn)一步結(jié)腸癌等ji病提供了前提和基礎(chǔ)。
1)組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常結(jié)腸組織。
推薦使用 DELF原代上皮細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為該細(xì)胞的培養(yǎng)基。
操作步驟如下:
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
注意事項(xiàng):
1)原代培養(yǎng)的分離細(xì)胞在初次接觸體外環(huán)境時(shí),雖然被分散成單個(gè)細(xì)胞,但它們之間的互相影響還是存在的, 而且這種影響對(duì)細(xì)胞能否存活是非常重要的。在這些細(xì)胞之間能產(chǎn)生一些促生長(zhǎng)的活性物質(zhì), 使細(xì)胞彼此互相促進(jìn)存活和生長(zhǎng)。如果接種的細(xì)胞密度過(guò)低, 細(xì)胞之間的促生長(zhǎng)作用很小, 雖然營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)很充足, 也很難使細(xì)胞適應(yīng)從體內(nèi)的組織環(huán)境到被分散后進(jìn)入獨(dú)立生存環(huán)境的變化過(guò)程。 如果接種的細(xì)胞密度過(guò)大,會(huì)導(dǎo)致?tīng)I(yíng)養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)不足, 代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代。
2)細(xì)胞鑒定:細(xì)胞角蛋白-18(CK-18)免yi熒光染色為陽(yáng)性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)jun、酵母和真jun。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:鋪路石狀細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
1、剪切組織:先將所取得的組織,用D-Hanks或Hanks液清洗,以去除表面血污,并用手術(shù)鑷去除黏附的結(jié)締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后,用手術(shù)刀將組織切成若干小塊,移入青霉素小瓶或小燒杯中,加入適量緩沖液,用彎頭眼科剪,反復(fù)剪切組織,直到組織成糊狀,約1mm3大小。靜置片刻后,用吸管吸去上層液體,加入適當(dāng)?shù)木彌_液再清洗一次。
2、消化分離:消化分離的目的是將細(xì)小的組織塊消化分離成細(xì)胞團(tuán)或分散的單個(gè)細(xì)胞,以利于進(jìn)一步的培養(yǎng),常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3、培養(yǎng):細(xì)胞懸液用計(jì)數(shù)板進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。用培養(yǎng)液將細(xì)胞數(shù)調(diào)整為(2~5)×105 cells/ml,或?qū)嶒?yàn)所需密度,分裝于培養(yǎng)瓶中,使細(xì)胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內(nèi),5%CO2,37℃靜置培養(yǎng)。一般3~5d,原代培養(yǎng)細(xì)胞可以黏附于瓶壁,并伸展開(kāi)始生長(zhǎng),可補(bǔ)加原培養(yǎng)液量1/2的新培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)2~3d后換液,一般7~14d可以長(zhǎng)滿瓶壁,進(jìn)行傳代。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
2)原代培養(yǎng)時(shí)初始培養(yǎng)在組織分散和分離細(xì)胞時(shí)細(xì)胞可能會(huì)受到嚴(yán)重的損傷。適當(dāng)增大原代培養(yǎng)接種的細(xì)胞密度, 給培養(yǎng)的細(xì)胞提供更多的類(lèi)似于在體內(nèi)時(shí)細(xì)胞之間的相互作用, 會(huì)極大提高原代培養(yǎng)的細(xì)胞在體外存活率。待細(xì)胞適應(yīng)體外環(huán)境后進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí)再以較低的密度接種和培養(yǎng)。
3)由于細(xì)胞之間的相互的內(nèi)在聯(lián)系被打破,分離細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)經(jīng)歷的生存環(huán)境改變很大,在體外存活和生長(zhǎng)的難度相應(yīng)增加。 對(duì)于貼壁依賴性細(xì)胞來(lái)說(shuō),盡快使接種的細(xì)胞貼壁,是決定培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵??梢栽诮臃N后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 3h 到 5h,由于細(xì)胞懸液中帶有少量培養(yǎng)液, 細(xì)胞即可以維持存活, 又可以很快接觸到培養(yǎng)瓶底壁, 是細(xì)胞迅速黏附于底物,待細(xì)胞貼壁后,再補(bǔ)足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
3、分離細(xì)胞培養(yǎng)法—懸浮型細(xì)胞培養(yǎng) 。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人急性原粒細(xì)胞白血病細(xì)胞 KASUMI-1(STR鑒定正確) |
SC-1 (小鼠胚胎細(xì)胞) |
BMP8b Antibody Blocking Peptide |
IM-9 (人外周血B淋ba細(xì)胞) |
PC-61 (小鼠雜交瘤細(xì)胞CD25) |
Phospho-BLNK(Tyr84) Antibody Blocking Peptide |
NCI-H23 (人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) (STR鑒定正確) |
35.1(雜交瘤細(xì)胞抗CD2)(STR鑒定正確) |
STK22C Antibody Blocking Peptide |
RT4 (人膀胱移行細(xì)胞瘤細(xì)胞) (STR鑒定正確) |
COS-1 (非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞) |
GRB10 Antibody Blocking Peptide |
TE-11 (人食管癌細(xì)胞) |
ST (豬睪丸細(xì)胞) |
Recombinant human GFRAL protein, C-His-Avi (HEK293) |
MHCC97-L (人低轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞) |
DT40 (雞淋ba瘤細(xì)胞) |
Histone H3 (mono methyl K79) Antibody Blocking Peptide |
COV434 (人卵巢顆粒腫瘤細(xì)胞) |
SHZ-88 (大鼠乳腺癌細(xì)胞) (種屬鑒定正確) |
PCDH18 Antibody Blocking Peptide |
MKN-7 (人胃癌細(xì)胞) (STR鑒定正確) |
MMQ (大鼠垂體瘤細(xì)胞) (種屬鑒定正確) |
TRMT6 Antibody Blocking Peptide |
KGN (人卵巢顆粒細(xì)胞) (STR鑒定正確) |
大鼠腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 |
AK8 Antibody Blocking Peptide |
HT-3 (人zi宮頸癌細(xì)胞) |
小鼠食管上皮細(xì)胞 |
HDAC7 Antibody Blocking Peptide |
TOV-112D (人上皮性卵巢癌細(xì)胞) (STR鑒定正確) |
豬脂肪細(xì)胞 |
DOCK8 Antibody Blocking Peptide |
NCI-H146 [H146](人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) (STR鑒定正確) |
兔肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞 |
A2LD1/GGACT Antibody Blocking Peptide |
EAC (小鼠艾氏腹水癌細(xì)胞) |
人肺成纖維細(xì)胞 |
METTL2B Antibody Blocking Peptide |
PA317 (小鼠成纖維細(xì)胞) |
大鼠胰腺星狀細(xì)胞 |
Phospho-Aurora B (Thr232)/ C (Thr198) Antibody Blocking Peptide |
BNL 1ME A.7R.1 (小鼠肝上皮細(xì)胞) |
大鼠胰腺上皮細(xì)胞 |
小鼠結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞CA2 Antibody Blocking Peptide |