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公司所有產(chǎn)品均不得用于臨床診斷,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
產(chǎn)品名稱 |
大鼠肝實質(zhì)細胞 |
英文名稱 |
Rat liver parenchymal cells |
產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
貨號 |
P-X1569 |
細胞介紹:
隨著人們生活水平的提高,飲食習慣的改變,腫瘤發(fā)病率也在不斷的增加,如肝癌、胃癌和大腸癌等明顯增加的趨勢。肝臟作為人體重要的器官,在整個物質(zhì)代謝過程中具有廣泛而多樣的功能。肝臟也是體內(nèi)yao物代謝的重要器官,體內(nèi)復雜的環(huán)境對yao物代謝等的影響是不言而喻的。
但是在體研究yao物或其它化學物質(zhì)在肝細胞代謝的分子機制有一定的困難,因此我們建立體外的原代肝細胞培養(yǎng)模型用于肝細胞分子生物學特征的研究,作為對在體肝臟研究模型的有益補充。采用改良的灌流方法將肝臟中的肝實質(zhì)細胞分離、純化、體外培養(yǎng),**分析原代肝細胞的生長和功能狀態(tài),為肝細胞分子生物學特征的研究以及新藥對肝臟的作用機制的研究提供更有價值的線索,以更好的解釋yao物作用的機制。
1)組織來源于實驗動物的正常肝組織。
2)細胞鑒定:葡萄糖-6-磷酸酶(glucose-6-phosphatase)化學染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細jun、酵母和真jun。
5)細胞生長方式:上皮樣,多角形細胞,貼壁培養(yǎng)。
我們推薦使用 Delf 原代肝實質(zhì) 細胞 培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
操作步驟如下:
1、剪切組織:先將所取得的組織,用D-Hanks或Hanks液清洗,以去除表面血污,并用手術鑷去除黏附的結締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后,用手術刀將組織切成若干小塊,移入青霉素小瓶或小燒杯中,加入適量緩沖液,用彎頭眼科剪,反復剪切組織,直到組織成糊狀,約1mm3大小。靜置片刻后,用吸管吸去上層液體,加入適當?shù)木彌_液再清洗一次。
2、消化分離:消化分離的目的是將細小的組織塊消化分離成細胞團或分散的單個細胞,以利于進一步的培養(yǎng),常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3、培養(yǎng):細胞懸液用計數(shù)板進行細胞計數(shù)。用培養(yǎng)液將細胞數(shù)調(diào)整為(2~5)×105 cells/ml,或實驗所需密度,分裝于培養(yǎng)瓶中,使細胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內(nèi),5%CO2,37℃靜置培養(yǎng)。一般3~5d,原代培養(yǎng)細胞可以黏附于瓶壁,并伸展開始生長,可補加原培養(yǎng)液量1/2的新培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)2~3d后換液,一般7~14d可以長滿瓶壁,進行傳代。
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
注意事項:
1)原代培養(yǎng)的分離細胞在初次接觸體外環(huán)境時,雖然被分散成單個細胞,但它們之間的互相影響還是存在的, 而且這種影響對細胞能否存活是非常重要的。在這些細胞之間能產(chǎn)生一些促生長的活性物質(zhì), 使細胞彼此互相促進存活和生長。如果接種的細胞密度過低, 細胞之間的促生長作用很小, 雖然營養(yǎng)物質(zhì)很充足, 也很難使細胞適應從體內(nèi)的組織環(huán)境到被分散后進入獨立生存環(huán)境的變化過程。 如果接種的細胞密度過大,會導致營養(yǎng)物質(zhì)供應不足, 代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代。
2)原代培養(yǎng)時初始培養(yǎng)在組織分散和分離細胞時細胞可能會受到嚴重的損傷。適當增大原代培養(yǎng)接種的細胞密度, 給培養(yǎng)的細胞提供更多的類似于在體內(nèi)時細胞之間的相互作用, 會極大提高原代培養(yǎng)的細胞在體外存活率。待細胞適應體外環(huán)境后進行傳代培養(yǎng)時再以較低的密度接種和培養(yǎng)。
3)由于細胞之間的相互的內(nèi)在聯(lián)系被打破,分離細胞在體外培養(yǎng)時經(jīng)歷的生存環(huán)境改變很大,在體外存活和生長的難度相應增加。 對于貼壁依賴性細胞來說,盡快使接種的細胞貼壁,是決定培養(yǎng)能否成功的關鍵??梢栽诮臃N后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 3h 到 5h,由于細胞懸液中帶有少量培養(yǎng)液, 細胞即可以維持存活, 又可以很快接觸到培養(yǎng)瓶底壁, 是細胞迅速黏附于底物,待細胞貼壁后,再補足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
3、分離細胞培養(yǎng)法—懸浮型細胞培養(yǎng) 。
公司正在出售的產(chǎn)品:
HCC827人非小細胞肺癌細胞 |
H157人口腔鱗狀上皮癌細胞 |
phospho-HSF1 (Ser307) Antibody Blocking Peptide |
SNU-1105腦部多形性成釉細胞瘤 |
A2780+GFP人卵巢癌細胞 |
NMDAR1 Antibody Blocking Peptide |
PC-3/nKR前列腺癌 |
K562AZQR人慢性骨髓性白血病細胞 |
Histone H3 (acetyl K27) Antibody Blocking Peptide |
KOPN-8人B淋ba細胞白血病細胞 |
KP-N-YN人腦神經(jīng)母細胞 |
GPR27 Antibody Blocking Peptide |
JM人T淋ba細胞 |
EJ人膀胱癌細胞 |
NBPF3 Antibody Blocking Peptide |
SK-N-DZ人成神經(jīng)瘤細胞 |
GP293 (STR)人胚腎細胞 |
EMR1/F4/80 Antibody Blocking Peptide |
U87 MG/LUC (STR)人惡性膠質(zhì)瘤細胞 |
CCC-HEH-2 (STR)人胚胎心肌組織來源細胞 |
Recombinant human ANO1 protein, His |
calu-1-luc-EGFP人肺癌細胞 |
MSC-LUC-PURO人臍帶間充質(zhì)干細胞 |
phospho-Acetyl Coenzyme A Carboxylase alpha (Ser1263) Antibody Blocking Peptide |
Li-7 (STR)人肝癌細胞 |
ACC-M人涎腺癌細胞 |
SLC17A3 Antibody Blocking Peptide |
HL-7702人肝細胞 |
SGC7901/DDP (STR)人胃癌順鉑耐藥株 |
DPCR1 Antibody Blocking Peptide |
143B/RFP (STR)人骨肉瘤細胞 |
MDA-MB-175 VII (STR)人乳腺癌細胞 |
SCGB2A1 Antibody Blocking Peptide |
TF-1 (STR)人紅系白血病細胞 |
MDA-MB-134-VI (STR)人乳腺導管癌細胞 |
TRA2A Antibody Blocking Peptide |
CEM/C1 (STR)人急性淋ba細胞 |
BE(2)-M17 (STR)人神經(jīng)母細胞 |
SPEM1 Antibody Blocking Peptide |
Nthy-ori 3-1 (STR)人甲狀腺正常細胞 |
Phoenix-AMPHO人腎上皮細胞 |
CD14 Antibody Blocking Peptide |
HCT-116+OX耐藥(8ug/mLOxaliplatin)人結腸癌細胞 |
KYSE-410人食管鱗癌細胞 |
大鼠肝實質(zhì)細胞AIMP2 Antibody Blocking Peptide |