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服務(wù):
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測(cè)范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測(cè)試劑盒,有效控制檢測(cè)試劑成本。并可提供免費(fèi)代測(cè)。
產(chǎn)品名稱 |
英文名稱 |
貨號(hào) |
COL8α1人Ⅷ型膠原α1elisa試劑盒說(shuō)明書(shū) |
Human Collagen Type VIII Alpha 1(COL8a1)ELISA Kit |
PH103564 |
優(yōu)勢(shì)特點(diǎn):產(chǎn)品僅用于科研
1.高效、靈敏、特異的抗體;
2.穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
3.吸附性能好,空白值低,孔低透明度高的固相載體;
4.使用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)液、尿液、唾液等等多種標(biāo)本類型;
5.節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔)
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制50 ng/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml/瓶。
5. 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測(cè)溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測(cè)稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(100ul/孔),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測(cè)溶液A加990ul檢測(cè)稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。
7. 檢測(cè)溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測(cè)稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測(cè)溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
注意事項(xiàng):
1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3. 各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5 分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD 值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的OD 值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物請(qǐng)避光保存。
7. 嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9. 本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
雙嘧達(dá)莫(標(biāo)準(zhǔn)品) Dipyridamole
質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 小鼠絡(luò)絲蛋白(RL)ELISA試劑盒 ,英文名: RL ELISA Kit
羧甲司坦(標(biāo)準(zhǔn)品) S-Carboxymethyl-L-cysteine 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 小鼠錨定蛋白重復(fù)域蛋白1(ANKRD1)ELISA試劑盒 ,英文名: ANKRD1 ELISA Kit
硝酸異山梨酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Isosorbide dinitrate 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 小鼠酶(CA)ELISA試劑盒 ,英文名: CA ELISA Kit
月桂氮卓酮;氮酮 Laurocapram 質(zhì)量規(guī)格:>97% 小鼠酶(CAT)ELISA 試劑盒 48T/96T 試劑盒 組裝/原裝
(標(biāo)準(zhǔn)品) Oxymetazoline 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 小鼠酶(CAT)ELISA試劑盒 ,英文名: CAT ELISA Kit
依他尼酸(標(biāo)準(zhǔn)品) Ethacrynic acid 質(zhì)量規(guī)格:供檢查用 小鼠酶1(CA-1)ELISA試劑盒 ,英文名: CA-1 ELISA Kit
鹽酸馬普替林(標(biāo)準(zhǔn)品) Maprotiline 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 小鼠酶1(PON1)ELISA試劑盒 ,英文名: PON1 ELISA Kit
鹽酸肼屈嗪(標(biāo)準(zhǔn)品) Hydralazine 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 小鼠酶2(CA-2)ELISA檢測(cè)試劑盒Mousecarbonicanhydrase2,CA-2ELISAKit 96T/48T
鹽酸羥嗪(標(biāo)準(zhǔn)品) Hydroxyzine di 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 小鼠酶2(CA-2)ELISA試劑盒 ,英文名: CA-2 ELISA Kit
金諾芬(標(biāo)準(zhǔn)品) Auranofin
質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 小鼠酶2(PON2)ELISA試劑盒 ,英文名: PON2 ELISA Kit
星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基AM溴藍(lán)[pH指示劑]Bromochlorophenol Blue質(zhì)量規(guī)格:pH指示劑
APCDD1 Others Human 人 APCDD1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 乙基橙[pH指示劑]Ethyl Orange質(zhì)量規(guī)格:pH指示劑
人B母細(xì)胞;HMy2.CIR4-乙氧基橘紅鹽酸鹽(>95.0%(T))4-Ethoxychrysoidine 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(T)
正常大鼠腎細(xì)胞(EGF受體陽(yáng)性);NRK49F 轉(zhuǎn)移胰腺腺癌細(xì)胞,AsPC-1細(xì)胞 McCoy細(xì)胞,小鼠成纖維細(xì)胞系DAABD-Cl [=4-[2-(二甲氨基)乙氨基磺酰]-7-氯-2,1,3-苯并惡二唑DAABD-Cl [=4-[2-(Dimethylamino)ethylaminosulfonyl]-7-chloro-2,1,3-benzoxadiazole]質(zhì)量規(guī)格:用于蛋白質(zhì)組分析,用于高效液相色譜標(biāo)記,熒光染料,用于質(zhì)譜的衍生化試劑
5-8F,
人高轉(zhuǎn)移鼻咽癌細(xì)胞系 Human2,3-萘二醛(>99.0%(GC))2,3-Naphthalenedialdehyde質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)
Senkyunolide C
91652-78-7 中文名:洋川芎內(nèi)酯C 分子式:C12H12O3 Humanplacealprotein,PPELISAKit人胎盤(pán)蛋白(PP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Docosanoic acid 112-85-6 中文名:二十二烷酸 分子式:C22H44O2 兔子細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Pilosol A 501086-15-3 中文名: 分子式:C13H12O Human plasminogen activator inhibitor (PAI) ELISA Kit 人纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA試劑盒
Glycerol 56-81-5 中文名:甘油 分子式:C3H8O3 HumanAmylinELISAKit 人胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Riligustilide 89354-45-0
中文名: 分子式:C24H28O4 Humandeoxypyridinoline,DPDELISA試劑盒人脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
操作流程:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
COL8α1人Ⅷ型膠原α1elisa試劑盒說(shuō)明書(shū)(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過(guò)夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過(guò)洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。