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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:hfl-I細胞

  • 產(chǎn)品型號: BH-0109365
  • 產(chǎn)品**:派瑞曼
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
hfl-I細胞來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業(yè)的實驗室,可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。
詳情介紹:

產(chǎn)品名稱

hfl-I細胞

規(guī)格

T25

貨號

BH-0109365

產(chǎn)品詳細 胚肺成纖維細胞;hfl-I
形態(tài)特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 正常胚胎肺成纖維細胞
培養(yǎng)條件 DMEM(高糖)+10%FBS,37℃,5%CO2
傳代方法 消化CQ-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
細胞生物學研究有以下幾個方面。產(chǎn)品僅用于科學研究
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括。
①細胞核、染色體以及基因表達的研究。
②生物膜與細胞器的研究。
③細胞骨架體系的研究。
④細胞增殖及其調(diào)控。
⑤細胞分化及其調(diào)控。
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)。
⑦細胞的起源與進化。
⑧細胞工程。

實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
    1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;
    2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
    3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織完全被消化;
    4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
    5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、熒光鑒定:
    1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
    2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
    3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
    4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
    5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
    6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

培養(yǎng)操作:
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。      
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。 
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
心肌轉錄因子GATA3   英文名稱:   cardiac muscle anscription factor GATA3   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   GATA3  Androstenediol-3-acetate  1639-43-6  中文名:雄甾烯二醇-3-乙酸酯  分子式:C21H32O3 

心肌轉錄因子 4(GATA4)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進口分裝  Nitrendipine  中文名:尼群地平  分子式:C18H20N2O
維生素B HPLC≥99% 20mg 人膠質細胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)試劑盒 Human GDNF ELISA KIT

維生素B HPLC≥99% 20mg RatAi-ThrombinⅢ,AT-ⅢELISAKit大鼠抗凝血酶Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

維生素B HPLC≥99% 20mg 組蛋白H3-K4甲基化共沉淀分析試劑盒5

維生素B HPLC≥99% 20mg Mouseai-EndomysialAibodyIgA,EMAIgAELISA試劑盒小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMAIgA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

維生素B HPLC≥99% 20mg 小鼠乙酰輔酶A羧化酶α(ACACα)ELISA試劑盒 ,英文名: ACACα ELISA Kit

維生素C HPLC≥99% 20mg 兔子Ⅲ型膠原(ColⅢ)ELISA檢測試劑盒rabbitCollageypeⅢ,ColⅢELISAKIT 96T/48T

維生素D HPLC≥99% 20mg 犬骨橋素(OPN)試劑盒 Canine Osteopoin ELISA Kit

維生素D HPLC≥99% 20mg 英文名稱HumanFDPELISAKit人纖維蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)規(guī)格:96T/48T

維生素E HPLC≥98% 20mg 化線粒體總RNA萃取試劑盒20

維生素K HPLC≥99% 20mg RatIerleukin16,IL-16ELISA試劑盒大鼠白介素16(IL-16)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
羊源性恒溫核酸檢測試劑盒24T/48TNicorandil651416尼可地爾

鴨源性恒溫核酸檢測試劑盒24T/48TNicarbazin35尼卡巴嗪

豬源性恒溫核酸檢測試劑盒24T/48TNevirapine12961奈偉拉平

NOS基因恒溫核酸檢測試劑盒24T/48TNeutral berberine sulfate3161硫酸黃連素

CaMV35S基因恒溫核酸檢測試劑盒24T/48TNeritaloside4653
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據(jù)實際進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
hfl-I細胞應用的學科領域較為寬廣,如細胞學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等; 
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟
可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。


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