產品詳細 胚腎細胞；293T
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 293細胞株插入SV40T-抗原的溫度敏感基因后產生的高轉染效率的衍生株稱為293T。
培養(yǎng)條件 DMEM(高糖）+10%FBS
傳代方法 1：2傳代
細胞生物學研究有以下幾個方面。產品僅用于科學研究
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括。
①細胞核、染色體以及基因表達的研究。
②生物膜與細胞器的研究。
③細胞骨架體系的研究。
④細胞增殖及其調控。
⑤細胞分化及其調控。
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)。
⑦細胞的起源與進化。
⑧細胞工程。

實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
    1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大??；
    2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
    3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織完全被消化；
    4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
    5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、熒光鑒定：
    1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
    2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
    3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
    4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
    5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
    6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

培養(yǎng)操作：
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。      
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。 
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
小鼠可溶性E-選擇素(mouse sE-Selectin/sCD62E)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝     Docetaxel  114977-28-5  中文名：多西他賽  分子式：C43H53NO14 

小鼠可溶性E-選擇素   英文名稱：   soluble E-Selectin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   sE-Selectin/sCD62E  Domperidone  57808-66-9  中文名：多潘立酮  分子式：C
Salpha羥基表藤黃酸 HPLC≥95% 20mg 3′端DNA生物素轉移酶標記試劑盒10

羥基藤黃酸 HPLC≥95% 20mg Mousedopamine,DAELISA試劑盒小鼠多巴胺(DA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

雷公藤新堿 HPLC≥95% 20mg 小鼠細胞色素C(CYCS)ELISA試劑盒 ，英文名： CYCS ELISA Kit

衛(wèi)矛羰堿 HPLC≥95% 20mg 兔血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA檢測試劑盒Rabbitalpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISAKit 96T/48T

洋地黃蒽醌 HPLC≥95% 20mg 牛血清白蛋白(BSA)試劑盒 Bovine serum albumin,BSA ELISA kit

O苯甲酰戈米辛O HPLC≥95% 20mg 英文名稱HumanHRAbIgGELISAKit人抗心肌抗體IgG(HRAbIgG)規(guī)格：96T/48T

黑蔓定堿 HPLC≥95% 20mg 等電聚焦蛋白電泳(IEF)強化補水緩沖液50毫升

Triptonine B HPLC≥95% 20mg RatOsteocalcin/Boneglaprotein,OT/BGPELISA試劑盒大鼠骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

雷公藤寧堿A HPLC≥95% 20mg 小鼠細胞角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)ELISA試劑盒 ，英文名： CYFRA21-1 ELISA Kit

鬼箭羽堿，葉含衛(wèi)矛堿 HPLC≥95% 20mg 小鼠主要組織相容性復合體Ⅲ類(MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ)ELISA檢測試劑盒Mousemajorhistocompatibilitycomplex-Ⅲ,MHC-Ⅲ/H-2ⅢELISAKit 96T/48T
霍亂弧菌實時熒光PCR檢測試劑盒TThianaphthene955苯并噻吩

河弧菌實時熒光PCR檢測試劑盒TThiamphenicol153185甲砜霉素

擬態(tài)弧菌實時熒光PCR檢測試劑盒TThevetin B271279

艱難梭菌實時熒光PCR檢測試劑盒TThevebioside1145867

艱難梭菌tcdA基因實時熒光PCR檢測試劑盒TTetrahydrolachnophyllum lactone5677
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.293T細胞研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領域較為寬廣，如細胞學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等； 
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經濟
可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。