產(chǎn)品詳細 源胰腺癌細胞
形態(tài)特性 上皮細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性
培養(yǎng)條件
傳代方法 1:3傳代，CQ-4天傳1次
細胞生物學研究有以下幾個方面。產(chǎn)品僅用于科學研究
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括。
①細胞核、染色體以及基因表達的研究。
②生物膜與細胞器的研究。
③細胞骨架體系的研究。
④細胞增殖及其調(diào)控。
⑤細胞分化及其調(diào)控。
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)。
⑦細胞的起源與進化。
⑧細胞工程。

實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
    1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大?。?br>     2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
    3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織完全被消化；
    4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
    5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、熒光鑒定：
    1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
    2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
    3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
    4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
    5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
    6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

培養(yǎng)操作：
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。      
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。 
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子   英文名稱：   Brain-derived Neuroophin factor   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   BDNF  Antipyrine  60-80-0  中文名：安替比林  分子式：C11H12N2O 

腦衍化神經(jīng)營養(yǎng)因子 (BDNF)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國 R&D  Anthraquinone-2-carboxylic acid  117-78-2  中文名：蒽醌-2-羧酸  分子式：C15H8O4 

腦
氟甲喹（標準品）  Flumequine   質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%，標準品 Porcineacetylcholinereceptoraibody,AChRabELISA試劑盒豬乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

氟甲喹  Flumequine   質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR，進分 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)ELISA 試劑盒

噁喹酸/奧啉酸  Oxolinic acid  質(zhì)量規(guī)格：≥97% Rat soluble tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand (sAIL) ELISA Kit 大鼠可溶性腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(sAIL)ELISA試劑盒

柄曲霉素  Sterigmatocystin from Aspergillus Versicolor  質(zhì)量規(guī)格：>98%,進分 HumanSH2-coainingprotein,SHC/SLP-76ELISAKit 人SH2攜帶蛋白(SHC/SLP-76)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

尼日利亞菌素鈉鹽  Nigericin   質(zhì)量規(guī)格：>98%,進分 HumanAi-keratinaibody,AKAELISA試劑盒人抗角蛋白抗體(AKA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

無活菌素  Nonactin  質(zhì)量規(guī)格：>98%,美國進口 植物彌散吲哚-3-乙酸(IAA)比色法定量檢測試劑盒(包括萃取)20

曲古柳菌素A  Trichostatin A from Streptomyces sp  質(zhì)量規(guī)格：>98%,進分 HumanVascularEndothelialcellGrowthFactorB，VEGF-BELISAKit人血管內(nèi)皮細胞生長因子B(VEGF-B)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

羅布麻寧；夾竹桃麻素(標準品)  Acetovanillone  質(zhì)量規(guī)格：GC>98%,標準品 小鼠基質(zhì)γ羧基谷酸蛋白(MGP)ELISA試劑盒 ，英文名： MGP ELISA Kit

羅布麻寧；夾竹桃麻素  Acetovanillone  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 大鼠凝血酶抗凝血酶復合物(TAT)ELISA檢測試劑盒Ratthrombin-aithrombincomplex,TATELISAKit 96T/48T

虎杖甙/虎杖苷/白藜蘆醇苷  Polydatin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>97%,BR 人層連蛋白/板層素(LN)試劑盒 Human Laminin,LN ELISA KIT
人酸性成纖維細胞生長因子(AFGF/FGF1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 別稱:FGF-1, ECGF, ECGF-beta, A-FGF, FGFA, ECGFA, ECGFB, FGF-Alpha, HBGF1, HBGF-1, ECGFB, GLIO703, Heparin-binding growth factor 1 Human AFGF/FGF1(Acidic Fibroblast Growth Factor 1) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清，血漿或其他生物體液中天然及部分重組AFGF/FGF1濃度
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
PAXCS-003細胞采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領域較為寬廣，如細胞學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等； 
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟
可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。