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菌種的培養(yǎng):
1、是指食用菌菌絲體及其生長(zhǎng)基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種(種)、原種(二級(jí)種)和栽培種(三級(jí)種)三級(jí)。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經(jīng)過(guò)擴(kuò)大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過(guò)程。以作接入發(fā)酵罐中進(jìn)一步擴(kuò)大菌體量及合成產(chǎn)物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種,用無(wú)菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長(zhǎng)時(shí)間。所得孢子還需進(jìn)一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子(對(duì)于霉菌類孢子制備,多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基)。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子,如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長(zhǎng)、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無(wú)機(jī)鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無(wú)雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。產(chǎn)品僅用于科研
產(chǎn)品名稱:長(zhǎng)柄鏈格孢 斜面
編號(hào):BH-J011007
拉丁文:Alternaria longipes (Ellis & Everh.) E.W. Mason
分離基物: 油松
提供形式: 斜面培養(yǎng)物
**等級(jí): 1
模式菌株: no
應(yīng)用領(lǐng)域: 研究;教學(xué)
培養(yǎng)基: 綜合PDA:馬鈴薯煮汁1000mL,磷酸二氫鉀 3g,硫酸鎂 1.5g,葡萄糖 20g,維生素B1 10mg,瓊脂 20g,pH自然。馬鈴薯煮液:200g馬鈴薯,去皮,切塊,放入蒸餾水中煮沸30min,取濾液定容至1000mL,備用。121℃,15min。
生長(zhǎng)條件: 25℃,好氧
生長(zhǎng)特性: 在TWA+W培養(yǎng)基上菌落灰褐色,輪紋狀展開(kāi),氣生菌絲短,產(chǎn)孢量大。分生孢子梗中度黃褐色至褐色,頂端色淺,單生或簇生,屈膝狀彎曲,多分支。分生孢子淺至中度黃褐色,橢圓形,一般直,光滑,具3個(gè)假隔膜,21.5~28.5 × 7.5~11.5μm;臍部略突出,色暗。
存儲(chǔ)條件: 定期移植法
保存方法:
傳代保存法:培養(yǎng)基的濃度不宜過(guò)高,營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于適生長(zhǎng)溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種,則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。
液體石蠟覆蓋保存法:該法較前一種方法保存菌種的時(shí)間更長(zhǎng),適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧等的保存。
懸液保存法:
① 蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。
② 糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長(zhǎng)達(dá)10年。除此之外,也可使用緩沖液或食鹽水等進(jìn)行保存。
載體保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅膠保存法;④磁珠保存法;⑤麩皮保存法;⑥紙片(濾紙)保存法。
常用的冷凍保存法:
① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時(shí)使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時(shí)菌液加量不宜過(guò)多,有些可添加保護(hù)劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來(lái)吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi),再放入低溫冰箱內(nèi)進(jìn)行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內(nèi),再置于冰箱內(nèi)進(jìn)行冷凍保存。
③ 液氮保存法(-196℃):是適用范圍廣的微生物保存法。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過(guò)0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng),有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和完全,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過(guò)程,因菌種不同而異,一般可分為種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為種子,把種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級(jí)發(fā)酵。如果將種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過(guò)培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級(jí)種子,將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理,使用三級(jí)種子的發(fā)酵,稱為四級(jí)發(fā)酵。
公司專業(yè)代理ATCC菌種,長(zhǎng)柄鏈格孢 斜面價(jià)格優(yōu)惠,質(zhì)量保證,為大中型科研提供嚴(yán)格質(zhì)量體系控制的ATCC,CMCC,CICC,DSMZ標(biāo)準(zhǔn)菌株。
硫酸鋰一水(分子生物學(xué)級(jí)) Lithium sulfate monohydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,分子生物學(xué)級(jí) 基質(zhì)金屬蛋白酶11(MMP11)ELISA檢測(cè)試劑盒Monkeymaixmetalloproteinase11,MMP11ELISAKit 96T/48T
L-蘇糖酸鈣(>99%,BR)
L-Threonic acid calcium salt 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 基質(zhì)金屬蛋白酶3抑制劑(NNGH)500微升
L-酪氨酸二鈉鹽(>98%,BC)
L-Tyrosine di salt hydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC 基質(zhì)金屬蛋白酶3抑制劑(NNGH)500微升
魯米諾鈉(>98%,BS) Luminol,
salt 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BS 基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑(TIMP
-6氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷(>98%,BR)
Magenta-Gal 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 激肽釋放酶(KALLIKREIN)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20
-6氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷(>98%,BR)
Magenta-Gal 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 技術(shù)平臺(tái)操作20樣本
檸檬酸鎂九水(>98%,BR) Magnesium
nonahydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 寄生蟲(chóng)總RNA分離試劑盒20
十二烷基硫酸鎂(分子生物學(xué)) Magnesium dodecyl sulfate 質(zhì)量規(guī)格:>85%,分子生物學(xué)級(jí) 甲RNA電泳上樣緩沖液(RNA酶保護(hù))10毫升
氟化鎂(>98%,BR) Magnesium fluoride 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 甲變性RNA垂直電泳全套試劑盒10
氫氧化鎂(>99%,BR) Magnesium hydroxide 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 甲基綠復(fù)染試劑盒50
1146-98-1 Bromindione (Fluidane) 50mg
Poliovirus(PV)脊髓灰質(zhì)炎病毒通用型RT-LAMP試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度
1146-99-2 Chlorindione (Chlophenadione) 100mg
Xenohaliotis californiensis加州立克次體LAMP試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度
1146-99-2 Chlorindione (Chlophenadione) 10mM*1mLinDMSO Xenohaliotis californiensis加州立克次體LAMP試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度
114719-57-2 Fascaplysin (chloride) 1mg
California Encephalitis Virus加利福利亞腦炎病毒RT-LAMP試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度
114719-57-2 Fascaplysin (chloride) 5mg California Encephalitis Virus加利福利亞腦炎病毒RT-LAMP試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度
琥珀?;前粪邕?標(biāo)準(zhǔn)品 Coumarin 116-43-8 純品型,0.25g
丁二酸二甲酯 標(biāo)準(zhǔn)品 Ethyleneglycol-monobutylether 106-65-0 純品型,0.25g
丁二酸二乙酯,250mg 標(biāo)準(zhǔn)品 Picaridin 123-25-1 純品型,0.25G