產(chǎn)品名稱：棕色固氮菌

編號：BH-J011572

拉丁文:Azotobacter vinelandii

提供形式: 凍干粉

**等級: 1

模式菌株: no

培養(yǎng)基: 胰胨大豆瓊脂（TSA）：胰蛋白胨(酪蛋白胰酶消化物) 15.0g，大豆蛋白胨(大豆粉木瓜蛋白酶消化物) 5.0g，氯化鈉 5.0g，瓊脂 15.0g，pH7.3±0.2。121℃，15min。

生長條件: 30℃，好氧

保存方法：

傳代保存法：培養(yǎng)基的濃度不宜過高，營養(yǎng)成分不宜過于豐富，尤其是碳水化合物的濃度應在可能的范圍內盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于適生長溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種，則應在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。

液體石蠟覆蓋保存法：該法較前一種方法保存菌種的時間更長，適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧等的保存。

懸液保存法：

① 蒸餾水保存法：適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌，將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應注意避免水分的蒸發(fā)。

② 糖液保存法：適用于酵母菌，如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗處保存，可長達10年。除此之外，也可使用緩沖液或食鹽水等進行保存。

載體保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅膠保存法；④磁珠保存法；⑤麩皮保存法；⑥紙片(濾紙)保存法。

常用的冷凍保存法：產(chǎn)品僅用于科研

① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便，也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多，有些可添加保護劑。此外，也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器內，再放入低溫冰箱內進行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右)：即將菌種管插入干冰內，再置于冰箱內進行冷凍保存。

③ 液氮保存法(-196℃)：是適用范圍廣的微生物保存法。

微生物菌種的培養(yǎng)：

⒈ 孢子制備

⑴ 放線菌孢子的制備

一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1％，氮源不超過0.5％)，碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境，不利于放線菌孢子的形成，氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下，干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃，少數(shù)為37 ℃，培養(yǎng)時間為5～14天。

⑵ 霉菌孢子的制備

霉菌的孢子培養(yǎng)，一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖，而且這類培養(yǎng)基的表面積較大，可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25～28 ℃，培養(yǎng)時間為4～14天。

⒉ 種子制備

⑴ 搖瓶種子制備

搖瓶種子進罐，常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng)，有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和完全，并易被菌體分解利用，氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃，子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高，更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。

⑵ 種子罐種子制備

種子罐種子制備的工藝過程，因菌種不同而異，一般可分為種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中，經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲，這樣的種子稱為種子，把種子轉入發(fā)酵罐內發(fā)酵，稱為二級發(fā)酵。如果將種子接入體積較大的種子罐內，經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲，這樣制備的種子稱為二級種子，將二級種子轉入發(fā)酵罐內發(fā)酵，稱為三級發(fā)酵。同樣道理，使用三級種子的發(fā)酵，稱為四級發(fā)酵。

菌種的培養(yǎng)：

1、是指食用菌菌絲體及其生長基質組成的繁殖材料。菌種分為母種（種）、原種（二級種）和栽培種（三級種）三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復篩。

2、挑選具有某種能力的有用菌種，也稱種子制備，是指菌種在一定條件下，經(jīng)過擴大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質量的純生產(chǎn)菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進一步擴大菌體量及合成產(chǎn)物之用。

3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。

4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種，用無菌手續(xù)挑取少許，接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上，在25℃（或較高溫度）下培養(yǎng)5～7天（或較長時間。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子（對于霉菌類孢子制備，多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基）。

5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液，接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上，于25～28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。

6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子，如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的，則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體，作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應是易于被菌體利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米漿），及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯，無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%～20%。

6'-(二乙氨基)-1',2'-苯并熒烷(>98.0%(GC)(T))  6'-(Diethylamino)-1',2'-benzofluoran  質量規(guī)格：>98.0%(GC)(T) 英文名稱HumanBNPELISAKit人腦素(BNP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2'-(二芐氨基)-6'-(二乙氨基)熒烷(>98.0%(HPLC)(T))  2'-(Dibenzylamino)-6'-(diethylamino)fluoran  質量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T) 英文名稱HumanBonemorphogeneticproteieceptor1AELISAKit人骨成型蛋白質受體1A(BMPR1A)規(guī)格：96T/48T

3',6'-二甲氧基熒烷(>98.0%(HPLC))  3',6'-Dimethoxyfluoran  質量規(guī)格：>98.0%(HPLC) 英文名稱HumanBonemorphogeneticproteieceptorIIELISAKit人骨成型蛋白質受體II(BMPRII)規(guī)格：96T/48T

1,1'-亞甲基二-2-萘酚(>97.0%(GC))  1,1'-Methylenedi-2-naphthol  質量規(guī)格：>97.0%(GC) 英文名稱HumanBonemorphogeneticprotein2ELISAKit人骨成型蛋白質2(BMP-2)規(guī)格：96T/48T

2-萘基芐基醚(>98.0%(GC))  Benzyl 2-Naphthyl Ether  質量規(guī)格：>98.0%(GC) 英文名稱HumanBonemorphogeneticprotein2ELISAKit人骨成型蛋白質-2(BMP-2)規(guī)格：96T/48T

己酰胺(>98.0%(N))  Hexanamide  質量規(guī)格：>98.0%(N) 英文名稱HumanBonemorphogeneticprotein3ELISAKit人骨成型蛋白質3(BMP-3)規(guī)格：96T/48T

碳酸二苯酯(>99.0%(GC))  Diphenyl Carbonate  質量規(guī)格：>99.0%(GC) 英文名稱HumanBonemorphogeneticprotein4ELISAKit人骨成型蛋白質4(BMP-4)規(guī)格：96T/48T

二芐基亞砜(>98.0%(GC))  Dibenzyl Sulfoxide  質量規(guī)格：>98.0%(GC) 英文名稱HumanBonemorphogeneticprotein4ELISAKit人骨成型蛋白質-4(BMP-4)規(guī)格：96T/48T

乙二醇二苯醚(>99.0%(GC))  Ethylene Glycol Diphenyl Ether  質量規(guī)格：>99.0%(GC) 英文名稱HumanBonemorphogeneticprotein6ELISAKit人骨成型蛋白質6(BMP-6)規(guī)格：96T/48T

十六碳酰胺(>95.0%(GC))  Hexadecanamide  質量規(guī)格：>95.0%(GC) 英文名稱HumanBonemorphogeneticprotein7ELISAKit人骨成型蛋白質7(BMP-7)規(guī)格：96T/48T

1216468-02-8  SB 258585 hydrochloride  1mg  Foot-and-Mouth Disease Virus(FMDV)口蹄疫病毒SAT3亞型探針法熒光定量RT-PCR試劑盒  動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒  50次  低溫  負20度

1216468-02-8  SB 258585 hydrochloride  50mg  Foot-and-Mouth Disease Virus(FMDV)口蹄疫病毒SAT1亞型探針法熒光定量RT-PCR試劑盒  動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒  50次  低溫  負20度

1216468-02-8  SB 258585 hydrochloride  5mg  Foot-and-Mouth Disease Virus(FMDV)口蹄疫病毒SAT2亞型探針法熒光定量RT-PCR試劑盒  動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒  50次  低溫  負20度

121650-80-4  Pancopride (LAS 30451)  10mg  Foot-and-Mouth Disease Virus(FMDV)口蹄疫病毒O亞型探針法熒光定量RT-PCR試劑盒  動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒  50次  低溫  負20度

121650-80-4  Pancopride (LAS 30451)  1mg  Foot-and-Mouth Disease Virus(FMDV)口蹄疫病毒SAT1亞型探針法熒光定量RT-PCR試劑盒  動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒  50次  低溫  負20度

Dibenzothiophene D8,10ng/ul 標準品 PCBNo.151 33262-29-2 10ng/ul于環(huán)己烷,10ml

Dibenzothiophene,10ng/ul 標準品 PCBNo.149 132-65-0 10ng/ul于乙腈,10ml

Dibenzo(a,l)pyrene,10ng/ul 標準品 PCBNo.145 191-30-0 10ng/ul于乙腈,10ML

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