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產(chǎn)品規(guī)格:>5×105細胞數(shù)
包裝規(guī)格:1ml凍存細胞懸液或T-25培養(yǎng)瓶
產(chǎn)品名稱 |
人脈絡膜微血管內(nèi)皮細胞 |
英文名稱 |
Human choroidal microvascular endothelial cells |
產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
貨號 |
P-X1472 |
公司所有產(chǎn)品均不得用于臨床診斷,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細胞介紹:
脈絡膜新生血管 (choroidal neovascularization,CNV)已成為眼科學領域的研究熱點之一,目前多數(shù)體外研究應用的是人臍靜脈內(nèi)皮細胞或主動脈內(nèi)皮細胞等容易得到的大血管內(nèi)皮細胞。由于血管內(nèi)皮細胞具有器官特異性和組織特異性,用大血管內(nèi)皮細胞的研究結(jié)果很難客觀、準確地解釋CNV的發(fā)生機制。因此,建立脈絡膜微血管內(nèi)皮細胞(choroidal microvascular endothelial cells,CEC)體外培養(yǎng)體系,對深入研究CNV相關(guān)ji病具有十分重要的價值。
1)組織來源于人的正常眼組織。
我們推薦使用 delf 原代內(nèi)皮細胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
注意事項:
1)原代培養(yǎng)的分離細胞在初次接觸體外環(huán)境時,雖然被分散成單個細胞,但它們之間的互相影響還是存在的, 而且這種影響對細胞能否存活是非常重要的。在這些細胞之間能產(chǎn)生一些促生長的活性物質(zhì), 使細胞彼此互相促進存活和生長。如果接種的細胞密度過低, 細胞之間的促生長作用很小, 雖然營養(yǎng)物質(zhì)很充足, 也很難使細胞適應從體內(nèi)的組織環(huán)境到被分散后進入獨立生存環(huán)境的變化過程。 如果接種的細胞密度過大,會導致營養(yǎng)物質(zhì)供應不足, 代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代。
2)細胞鑒定:CD31免yi熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細jun、酵母和真jun。
5)細胞生長方式:呈鵝卵石樣,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
2)原代培養(yǎng)時初始培養(yǎng)在組織分散和分離細胞時細胞可能會受到嚴重的損傷。適當增大原代培養(yǎng)接種的細胞密度, 給培養(yǎng)的細胞提供更多的類似于在體內(nèi)時細胞之間的相互作用, 會極大提高原代培養(yǎng)的細胞在體外存活率。待細胞適應體外環(huán)境后進行傳代培養(yǎng)時再以較低的密度接種和培養(yǎng)。
3)由于細胞之間的相互的內(nèi)在聯(lián)系被打破,分離細胞在體外培養(yǎng)時經(jīng)歷的生存環(huán)境改變很大,在體外存活和生長的難度相應增加。 對于貼壁依賴性細胞來說,盡快使接種的細胞貼壁,是決定培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵。可以在接種后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 3h 到 5h,由于細胞懸液中帶有少量培養(yǎng)液, 細胞即可以維持存活, 又可以很快接觸到培養(yǎng)瓶底壁, 是細胞迅速黏附于底物,待細胞貼壁后,再補足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
3、分離細胞培養(yǎng)法—懸浮型細胞培養(yǎng) 。
操作步驟如下:
1、剪切組織:先將所取得的組織,用D-Hanks或Hanks液清洗,以去除表面血污,并用手術(shù)鑷去除黏附的結(jié)締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后,用手術(shù)刀將組織切成若干小塊,移入青霉素小瓶或小燒杯中,加入適量緩沖液,用彎頭眼科剪,反復剪切組織,直到組織成糊狀,約1mm3大小。靜置片刻后,用吸管吸去上層液體,加入適當?shù)木彌_液再清洗一次。
2、消化分離:消化分離的目的是將細小的組織塊消化分離成細胞團或分散的單個細胞,以利于進一步的培養(yǎng),常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3、培養(yǎng):細胞懸液用計數(shù)板進行細胞計數(shù)。用培養(yǎng)液將細胞數(shù)調(diào)整為(2~5)×105 cells/ml,或?qū)嶒炈杳芏?,分裝于培養(yǎng)瓶中,使細胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內(nèi),5%CO2,37℃靜置培養(yǎng)。一般3~5d,原代培養(yǎng)細胞可以黏附于瓶壁,并伸展開始生長,可補加原培養(yǎng)液量1/2的新培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)2~3d后換液,一般7~14d可以長滿瓶壁,進行傳代。
公司正在出售的產(chǎn)品:
SK-NO-1人急性髓系白血病細胞 |
兔胰島細胞 |
L3MBTL4 Antibody Blocking Peptide |
小鼠小腸平滑肌細胞 |
兔卵巢表面上皮細胞 |
CYP4F3 Antibody Blocking Peptide |
小鼠腸巨噬細胞 |
兔骨骼肌成纖維細胞 |
PGK1 Antibody Blocking Peptide |
小鼠腎上皮細胞 |
兔椎體終板軟骨細胞 |
ARHGAP20 Antibody Blocking Peptide |
小鼠卵巢間質(zhì)細胞 |
兔淋ba管成纖維細胞 |
RSV G Antibody Blocking Peptide |
小鼠骨細胞 |
兔DRG神經(jīng)元細胞 |
OSBPL11 Antibody Blocking Peptide |
小鼠毛囊干細胞 |
兔視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞 |
C6orf62 Antibody Blocking Peptide |
小鼠NK細胞 |
兔胚胎成纖維細胞 |
ZNF79 Antibody Blocking Peptide |
小鼠少突膠質(zhì)細胞 |
人輸尿管平滑肌細胞 |
Phospho-Rb (Ser807/Ser811) Antibody Blocking Peptide |
小鼠晶狀體上皮細胞 |
人食管纖維瘤細胞 |
VEGF-C Antibody Blocking Peptide |
小鼠眼外肌成纖維細胞 |
豬甲狀腺上皮細胞 |
Recombinant human IL-17A protein (Active, HEK293) |
兔肺微血管周細胞 |
羊肺微血管內(nèi)皮細胞 |
phospho-MNK1 (Thr250) Antibody Blocking Peptide |
兔心臟微血管內(nèi)皮細胞 |
狗腸神經(jīng)膠質(zhì)細胞 |
KNG1 Antibody Blocking Peptide |
兔膽囊上皮細胞 |
人心肌成纖維細胞 |
CDH11 Antibody Blocking Peptide |
兔腎小球內(nèi)皮細胞 |
人小腸平滑肌細胞 |
人脈絡膜微血管內(nèi)皮細胞HSC82 Antibody Blocking Peptide |