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公司所有產(chǎn)品均不得用于臨床診斷,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
產(chǎn)品名稱 |
人外周血巨噬細(xì)胞 |
英文名稱 |
Human primary peripheral blood macrophages |
產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
貨號(hào) |
P-X1460 |
產(chǎn)品規(guī)格:>5×105細(xì)胞數(shù)
包裝規(guī)格:1ml凍存細(xì)胞懸液或T-25培養(yǎng)瓶
細(xì)胞介紹:
巨噬細(xì)胞源自單核細(xì)胞,屬于細(xì)胞,有多種功能,屬不繁殖細(xì)胞群,難以長期培養(yǎng)。巨噬細(xì)胞在吞噬和異物和衰老死亡細(xì)胞、分泌生物活性物質(zhì),調(diào)節(jié)血細(xì)胞**與參與應(yīng)答等方面發(fā)揮著廣泛的生物學(xué)作用,是一類在體內(nèi)發(fā)揮重要效應(yīng)的細(xì)胞,為體內(nèi)的穩(wěn)態(tài)維持和組織防御提供保障。
1)組織來源于人的正常外周血組織。本細(xì)胞為終末分化細(xì)胞,增殖能力很弱,建議客戶收到細(xì)胞后直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn),不要進(jìn)行擴(kuò)增培養(yǎng)。
推薦使用 delf原代 巨噬 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為該細(xì)胞的培養(yǎng)基。
操作步驟如下:
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
注意事項(xiàng):
1)原代培養(yǎng)的分離細(xì)胞在初次接觸體外環(huán)境時(shí),雖然被分散成單個(gè)細(xì)胞,但它們之間的互相影響還是存在的, 而且這種影響對細(xì)胞能否存活是非常重要的。在這些細(xì)胞之間能產(chǎn)生一些促生長的活性物質(zhì), 使細(xì)胞彼此互相促進(jìn)存活和生長。如果接種的細(xì)胞密度過低, 細(xì)胞之間的促生長作用很小, 雖然營養(yǎng)物質(zhì)很充足, 也很難使細(xì)胞適應(yīng)從體內(nèi)的組織環(huán)境到被分散后進(jìn)入獨(dú)立生存環(huán)境的變化過程。 如果接種的細(xì)胞密度過大,會(huì)導(dǎo)致營養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)不足, 代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代。
2)細(xì)胞鑒定:CD68和MAC387免yi熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)jun、酵母和真jun。
5)細(xì)胞生長方式:圓形,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
1、剪切組織:先將所取得的組織,用D-Hanks或Hanks液清洗,以去除表面血污,并用手術(shù)鑷去除黏附的結(jié)締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后,用手術(shù)刀將組織切成若干小塊,移入青霉素小瓶或小燒杯中,加入適量緩沖液,用彎頭眼科剪,反復(fù)剪切組織,直到組織成糊狀,約1mm3大小。靜置片刻后,用吸管吸去上層液體,加入適當(dāng)?shù)木彌_液再清洗一次。
2、消化分離:消化分離的目的是將細(xì)小的組織塊消化分離成細(xì)胞團(tuán)或分散的單個(gè)細(xì)胞,以利于進(jìn)一步的培養(yǎng),常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3、培養(yǎng):細(xì)胞懸液用計(jì)數(shù)板進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。用培養(yǎng)液將細(xì)胞數(shù)調(diào)整為(2~5)×105 cells/ml,或?qū)嶒?yàn)所需密度,分裝于培養(yǎng)瓶中,使細(xì)胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內(nèi),5%CO2,37℃靜置培養(yǎng)。一般3~5d,原代培養(yǎng)細(xì)胞可以黏附于瓶壁,并伸展開始生長,可補(bǔ)加原培養(yǎng)液量1/2的新培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)2~3d后換液,一般7~14d可以長滿瓶壁,進(jìn)行傳代。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
2)原代培養(yǎng)時(shí)初始培養(yǎng)在組織分散和分離細(xì)胞時(shí)細(xì)胞可能會(huì)受到嚴(yán)重的損傷。適當(dāng)增大原代培養(yǎng)接種的細(xì)胞密度, 給培養(yǎng)的細(xì)胞提供更多的類似于在體內(nèi)時(shí)細(xì)胞之間的相互作用, 會(huì)極大提高原代培養(yǎng)的細(xì)胞在體外存活率。待細(xì)胞適應(yīng)體外環(huán)境后進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí)再以較低的密度接種和培養(yǎng)。
3)由于細(xì)胞之間的相互的內(nèi)在聯(lián)系被打破,分離細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)經(jīng)歷的生存環(huán)境改變很大,在體外存活和生長的難度相應(yīng)增加。 對于貼壁依賴性細(xì)胞來說,盡快使接種的細(xì)胞貼壁,是決定培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵??梢栽诮臃N后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 3h 到 5h,由于細(xì)胞懸液中帶有少量培養(yǎng)液, 細(xì)胞即可以維持存活, 又可以很快接觸到培養(yǎng)瓶底壁, 是細(xì)胞迅速黏附于底物,待細(xì)胞貼壁后,再補(bǔ)足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
3、分離細(xì)胞培養(yǎng)法—懸浮型細(xì)胞培養(yǎng) 。
公司正在出售的產(chǎn)品:
Beta-TC-6小鼠胰島素瘤 |
碳酸氫鈉溶液(7.5% )iCell-01300 |
THSD1 Antibody Blocking Peptide |
小鼠角膜上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
膠原酶IV |
HMGA1 Antibody Blocking Peptide |
豬皮膚成纖維細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
人轉(zhuǎn)化生長因子B3 |
PTGS1 Antibody Blocking Peptide |
雞腎小管上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
人白細(xì)胞介素10 |
HAPLN1 Antibody Blocking Peptide |
干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)分化試劑盒(培養(yǎng)體系) |
細(xì)胞污染高效劑,2000 × |
Slc34a2 Antibody Blocking Peptide |
原代內(nèi)皮祖細(xì)胞添加劑 |
細(xì)胞培養(yǎng)皿 |
CRYBA4 Antibody Blocking Peptide |
原代精原細(xì)胞添加劑 |
AML-12小鼠肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞 |
NFKB p65(acetyl-K310) Antibody Blocking Peptide |
原代成纖維細(xì)胞培養(yǎng)體系 |
EMT6小鼠乳腺癌細(xì)胞 |
ARRDC2 Antibody Blocking Peptide |
原代間充質(zhì)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)體系 |
22RV1人前列腺癌細(xì)胞 |
ANKRD22 Antibody Blocking Peptide |
原代腎系膜細(xì)胞培養(yǎng)體系 |
COS-7非洲綠猴腎細(xì)胞 SV40轉(zhuǎn)化 |
Filamin A Antibody Blocking Peptide |
原代破骨細(xì)胞培養(yǎng)體系 |
L5178Y TK+/- clone (3.7.2C)小鼠淋ba瘤細(xì)胞 |
IQGAP1 Antibody Blocking Peptide |
原代淋ba細(xì)胞培養(yǎng)體系 |
neuro-2a+luc小鼠腦神經(jīng)瘤細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 |
phospho-MEK1+MEK2 (Ser222+ Ser226) Antibody Blocking Peptide |
IMDM基礎(chǔ)培養(yǎng)基 |
Sp2/0-Ag14小鼠骨髓瘤細(xì)胞 |
C7 Antibody Blocking Peptide |
無外泌體血清 |
A7r5大鼠胸大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 |
ILRUN Antibody Blocking Peptide |
胰蛋白酶抑制劑 |
NRK-52E大鼠腎細(xì)胞 |
人外周血巨噬細(xì)胞AGT Antibody Blocking Peptide |