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公司所有產(chǎn)品均不得用于臨床診斷,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
產(chǎn)品名稱 |
小鼠腹膜間皮細(xì)胞 |
英文名稱 |
Primary mouse peritoneal mesothelial cells |
產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
貨號(hào) |
P-X1827 |
產(chǎn)品規(guī)格:>5×105細(xì)胞數(shù)
包裝規(guī)格:1ml凍存細(xì)胞懸液或T-25培養(yǎng)瓶
細(xì)胞介紹:
腹膜是指在存在高等脊椎動(dòng)物腹腔中的一層漿膜,主要由間皮及其外面的結(jié)締組織構(gòu)成。腹膜包覆大部分腹腔內(nèi)的器官,能分泌黏液潤(rùn)濕臟器的表面,減輕臟器間的摩擦。腹腔臟器的血液、和神經(jīng)組織經(jīng)由腹膜與外界相連。腹膜也具有吸收撞擊保護(hù)內(nèi)臟的效果。
1)組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常腹膜組織。
我們推薦使用 DELF 原代 間質(zhì) 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
腹膜間皮細(xì)胞是構(gòu)成腹膜的主要細(xì)胞群體,能分泌多種細(xì)胞因子,是腹膜原發(fā)腫瘤的實(shí)質(zhì)細(xì)胞,在腹膜纖維化和腹膜黏連形成中也起著關(guān)鍵作用。
2)細(xì)胞鑒定:波形蛋白(Vimentin)或角蛋白(Keratin)免yi熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)jun、酵母和真jun。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:三角形細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
操作步驟如下:
1、剪切組織:先將所取得的組織,用D-Hanks或Hanks液清洗,以去除表面血污,并用手術(shù)鑷去除黏附的結(jié)締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后,用手術(shù)刀將組織切成若干小塊,移入青霉素小瓶或小燒杯中,加入適量緩沖液,用彎頭眼科剪,反復(fù)剪切組織,直到組織成糊狀,約1mm3大小。靜置片刻后,用吸管吸去上層液體,加入適當(dāng)?shù)木彌_液再清洗一次。
2、消化分離:消化分離的目的是將細(xì)小的組織塊消化分離成細(xì)胞團(tuán)或分散的單個(gè)細(xì)胞,以利于進(jìn)一步的培養(yǎng),常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3、培養(yǎng):細(xì)胞懸液用計(jì)數(shù)板進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。用培養(yǎng)液將細(xì)胞數(shù)調(diào)整為(2~5)×105 cells/ml,或?qū)嶒?yàn)所需密度,分裝于培養(yǎng)瓶中,使細(xì)胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內(nèi),5%CO2,37℃靜置培養(yǎng)。一般3~5d,原代培養(yǎng)細(xì)胞可以黏附于瓶壁,并伸展開始生長(zhǎng),可補(bǔ)加原培養(yǎng)液量1/2的新培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)2~3d后換液,一般7~14d可以長(zhǎng)滿瓶壁,進(jìn)行傳代。
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
注意事項(xiàng):
1)原代培養(yǎng)的分離細(xì)胞在初次接觸體外環(huán)境時(shí),雖然被分散成單個(gè)細(xì)胞,但它們之間的互相影響還是存在的, 而且這種影響對(duì)細(xì)胞能否存活是非常重要的。在這些細(xì)胞之間能產(chǎn)生一些促生長(zhǎng)的活性物質(zhì), 使細(xì)胞彼此互相促進(jìn)存活和生長(zhǎng)。如果接種的細(xì)胞密度過低, 細(xì)胞之間的促生長(zhǎng)作用很小, 雖然營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)很充足, 也很難使細(xì)胞適應(yīng)從體內(nèi)的組織環(huán)境到被分散后進(jìn)入獨(dú)立生存環(huán)境的變化過程。 如果接種的細(xì)胞密度過大,會(huì)導(dǎo)致營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)不足, 代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代。
2)原代培養(yǎng)時(shí)初始培養(yǎng)在組織分散和分離細(xì)胞時(shí)細(xì)胞可能會(huì)受到嚴(yán)重的損傷。適當(dāng)增大原代培養(yǎng)接種的細(xì)胞密度, 給培養(yǎng)的細(xì)胞提供更多的類似于在體內(nèi)時(shí)細(xì)胞之間的相互作用, 會(huì)極大提高原代培養(yǎng)的細(xì)胞在體外存活率。待細(xì)胞適應(yīng)體外環(huán)境后進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí)再以較低的密度接種和培養(yǎng)。
3)由于細(xì)胞之間的相互的內(nèi)在聯(lián)系被打破,分離細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)經(jīng)歷的生存環(huán)境改變很大,在體外存活和生長(zhǎng)的難度相應(yīng)增加。 對(duì)于貼壁依賴性細(xì)胞來說,盡快使接種的細(xì)胞貼壁,是決定培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵??梢栽诮臃N后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 3h 到 5h,由于細(xì)胞懸液中帶有少量培養(yǎng)液, 細(xì)胞即可以維持存活, 又可以很快接觸到培養(yǎng)瓶底壁, 是細(xì)胞迅速黏附于底物,待細(xì)胞貼壁后,再補(bǔ)足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
3、分離細(xì)胞培養(yǎng)法—懸浮型細(xì)胞培養(yǎng) 。
公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠肝成纖維細(xì)胞 |
F56人腺癌細(xì)胞系 |
PGA3 Antibody Blocking Peptide |
激光共聚焦培養(yǎng)皿 |
hccc-9810人膽管細(xì)胞型肝癌細(xì)胞 |
SAGE1 Antibody Blocking Peptide |
hEM15A完全培養(yǎng)基 |
Hep3B2.1-7 [Hep3B] 人肝癌細(xì)胞 |
SLC6A18 Antibody Blocking Peptide |
ATDC5小鼠胚胎瘤細(xì)胞 |
HS683人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞 |
EME2 Antibody Blocking Peptide |
GC-1 spg小鼠精原細(xì)胞系 |
Ishikawa人zi宮內(nèi)膜癌細(xì)胞 |
Histone H3, family 3A Antibody Blocking Peptide |
L Wnt-3A小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞 |
KLE人zi宮內(nèi)膜癌細(xì)胞 |
GBP2 Antibody Blocking Peptide |
NIH/3T3小鼠胚胎細(xì)胞 |
Mahlavu 人肝癌細(xì)胞 |
MAP1B Antibody Blocking Peptide |
SV40-MES-13小鼠腎小球系膜細(xì)胞 |
MGC-803人胃癌細(xì)胞 |
ENPEP Antibody Blocking Peptide |
BRL大鼠肝細(xì)胞 |
T47D人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞 |
phospho-AKT3 (Ser472) Antibody Blocking Peptide |
PC12低分化+GFP大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞低分化+GFP |
SNU-398人肝癌細(xì)胞 |
Mafa Antibody Blocking Peptide |
Marc145非洲綠猴胚胎腎細(xì)胞 |
NCI-H1395人肺腺癌細(xì)胞 |
NRROS Antibody Blocking Peptide |
293T人胚腎細(xì)胞 |
NCI-H520人肺鱗癌細(xì)胞 |
ADORA2A Antibody Blocking Peptide |
AAV-293人胚腎細(xì)胞 |
OS-RC-2人腎癌細(xì)胞 |
Sialidase 3 Antibody Blocking Peptide |
C666-1人鼻咽癌細(xì)胞 |
RL95-2 人zi宮內(nèi)膜癌細(xì)胞 |
EP300 Antibody Blocking Peptide |
COLO320 DM 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 |
SK-HEP-1人肝腹水腺癌細(xì)胞 |
小鼠腹膜間皮細(xì)胞NSUN5P2 Antibody Blocking Peptide |