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公司所有產(chǎn)品均不得用于臨床診斷,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
產(chǎn)品名稱 |
小鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞 |
英文名稱 |
Mouse primary corneal stromal cells |
產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
貨號 |
P-X1971 |
產(chǎn)品規(guī)格:>5×105細(xì)胞數(shù)
包裝規(guī)格:1ml凍存細(xì)胞懸液或T-25培養(yǎng)瓶
細(xì)胞介紹:
角膜位于眼球前壁的一層透明膜,約占纖維膜的前 1/6,從后面看角膜呈正圓形,從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不同,中央部薄。角膜分為五層,由前向后依次為:上皮細(xì)胞層、前彈力層、基質(zhì)層、后彈力層、內(nèi)皮細(xì)胞層。
角膜基質(zhì)為中層結(jié)締組織,完全透明,角膜基質(zhì)層中的主要細(xì)胞成分是角膜基質(zhì)細(xì)胞,它能合成和分泌纖維,并且對膠原束的排列和平衡都起作用。
1)組織來源于實(shí)驗(yàn)動物的正常眼組織。
2)細(xì)胞鑒定:波形蛋白(Vimentin)免yi熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)jun、酵母和真jun。
5)細(xì)胞生長方式:長梭形細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
我們推薦使用 delf 原代 基質(zhì) 細(xì)胞 培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
操作步驟如下:
1、剪切組織:先將所取得的組織,用D-Hanks或Hanks液清洗,以去除表面血污,并用手術(shù)鑷去除黏附的結(jié)締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后,用手術(shù)刀將組織切成若干小塊,移入青霉素小瓶或小燒杯中,加入適量緩沖液,用彎頭眼科剪,反復(fù)剪切組織,直到組織成糊狀,約1mm3大小。靜置片刻后,用吸管吸去上層液體,加入適當(dāng)?shù)木彌_液再清洗一次。
2、消化分離:消化分離的目的是將細(xì)小的組織塊消化分離成細(xì)胞團(tuán)或分散的單個(gè)細(xì)胞,以利于進(jìn)一步的培養(yǎng),常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3、培養(yǎng):細(xì)胞懸液用計(jì)數(shù)板進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。用培養(yǎng)液將細(xì)胞數(shù)調(diào)整為(2~5)×105 cells/ml,或?qū)嶒?yàn)所需密度,分裝于培養(yǎng)瓶中,使細(xì)胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內(nèi),5%CO2,37℃靜置培養(yǎng)。一般3~5d,原代培養(yǎng)細(xì)胞可以黏附于瓶壁,并伸展開始生長,可補(bǔ)加原培養(yǎng)液量1/2的新培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)2~3d后換液,一般7~14d可以長滿瓶壁,進(jìn)行傳代。
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
注意事項(xiàng):
1)原代培養(yǎng)的分離細(xì)胞在初次接觸體外環(huán)境時(shí),雖然被分散成單個(gè)細(xì)胞,但它們之間的互相影響還是存在的, 而且這種影響對細(xì)胞能否存活是非常重要的。在這些細(xì)胞之間能產(chǎn)生一些促生長的活性物質(zhì), 使細(xì)胞彼此互相促進(jìn)存活和生長。如果接種的細(xì)胞密度過低, 細(xì)胞之間的促生長作用很小, 雖然營養(yǎng)物質(zhì)很充足, 也很難使細(xì)胞適應(yīng)從體內(nèi)的組織環(huán)境到被分散后進(jìn)入獨(dú)立生存環(huán)境的變化過程。 如果接種的細(xì)胞密度過大,會導(dǎo)致營養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)不足, 代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代。
2)原代培養(yǎng)時(shí)初始培養(yǎng)在組織分散和分離細(xì)胞時(shí)細(xì)胞可能會受到嚴(yán)重的損傷。適當(dāng)增大原代培養(yǎng)接種的細(xì)胞密度, 給培養(yǎng)的細(xì)胞提供更多的類似于在體內(nèi)時(shí)細(xì)胞之間的相互作用, 會極大提高原代培養(yǎng)的細(xì)胞在體外存活率。待細(xì)胞適應(yīng)體外環(huán)境后進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí)再以較低的密度接種和培養(yǎng)。
3)由于細(xì)胞之間的相互的內(nèi)在聯(lián)系被打破,分離細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)經(jīng)歷的生存環(huán)境改變很大,在體外存活和生長的難度相應(yīng)增加。 對于貼壁依賴性細(xì)胞來說,盡快使接種的細(xì)胞貼壁,是決定培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵??梢栽诮臃N后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 3h 到 5h,由于細(xì)胞懸液中帶有少量培養(yǎng)液, 細(xì)胞即可以維持存活, 又可以很快接觸到培養(yǎng)瓶底壁, 是細(xì)胞迅速黏附于底物,待細(xì)胞貼壁后,再補(bǔ)足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
3、分離細(xì)胞培養(yǎng)法—懸浮型細(xì)胞培養(yǎng) 。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人脾臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞 |
大鼠原代脊髓成纖維細(xì)胞 |
Phospho-ACACA (Ser79) Antibody Blocking Peptide |
PK-1胰腺導(dǎo)管腺癌 |
大鼠原代肝竇內(nèi)皮細(xì)胞 |
CDH23 Antibody Blocking Peptide |
Hep3B2.1-7-Luc熒光素酶標(biāo)記的人肝癌細(xì)胞 |
大鼠原代晶狀體上皮細(xì)胞 |
AATF Antibody Blocking Peptide |
KYSE-150-Luc熒光素酶標(biāo)記的人食管鱗癌細(xì)胞 |
兔原代角膜內(nèi)皮細(xì)胞 |
INTS8 Antibody Blocking Peptide |
hCMEC/D3 (STR)永生化人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞 |
人原代食管纖維瘤細(xì)胞 |
NIPSNAP3A Antibody Blocking Peptide |
NCI-H498直腸癌 |
小鼠原代輸尿管平滑肌細(xì)胞 |
KCNK18 Antibody Blocking Peptide |
CHO-K1- COGFP-PURO中國倉鼠卵巢細(xì)胞 |
小鼠原代氣管上皮細(xì)胞 |
NNMT Antibody Blocking Peptide |
RTG-2鱒魚卵細(xì)胞 |
大鼠原代杏仁核神經(jīng)元細(xì)胞 |
CENPM Antibody Blocking Peptide |
HBZY-1大鼠腎小球系膜細(xì)胞 |
兔原代脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞 |
SLC22A10 Antibody Blocking Peptide |
Rin-mSF大鼠胰島素瘤細(xì)胞 |
兔原代氣管平滑肌細(xì)胞 |
SLC39A4 Antibody Blocking Peptide |
HME7黑色素瘤細(xì)胞 |
兔原代眼外肌成纖維細(xì)胞 |
ZNF576 Antibody Blocking Peptide |
Lncap前列腺癌細(xì)胞 |
人口腔黏膜成纖維細(xì)胞 |
PTPRF Antibody Blocking Peptide |
CT26.WT/LUC小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞帶熒光素酶 |
大鼠原代胃cajal間質(zhì)細(xì)胞 |
Recombinant hepatitis B e like particle protein, His |
人原代扁桃體動脈平滑肌細(xì)胞 |
大鼠原代腦皮層神經(jīng)元細(xì)胞 |
MRM1 Antibody Blocking Peptide |
兔原代滑膜成纖維細(xì)胞 |
兔原代腎集合管上皮細(xì)胞 |
小鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞ADCY10 Antibody Blocking Peptide |