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公司所有產(chǎn)品均不得用于臨床診斷,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
產(chǎn)品名稱 |
小鼠結腸粘膜上皮細胞 |
英文名稱 |
Mouse primary colon mucosal epithelial cells |
產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
貨號 |
P-X1809 |
產(chǎn)品規(guī)格:>5×105細胞數(shù)
包裝規(guī)格:1ml凍存細胞懸液或T-25培養(yǎng)瓶
細胞介紹:
結腸在右髂窩內續(xù)于盲腸,在第 3骶椎平面連接直腸。結腸分升結腸、橫結腸、降結腸和乙狀結腸4部,大部分固定于腹后壁,結腸的排列酷似英文字母M,將小腸包圍在內。結腸橫切面由內到外依次為:粘膜(上皮層,固有層,粘膜肌層),粘膜下層,肌層,外膜。結腸黏膜上皮在環(huán)境或遺傳等多種致癌因素作用下導致結腸癌,是常見的惡性腫瘤之一。因此,體外培養(yǎng)結腸黏膜上皮細胞為研究進一步結腸癌等ji病提供了前提和基礎。
1)組織來源于實驗動物的正常結腸組織。
推薦使用 DELF原代上皮細胞培養(yǎng)體系 作為該細胞的培養(yǎng)基。
操作步驟如下:
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
注意事項:
1)原代培養(yǎng)的分離細胞在初次接觸體外環(huán)境時,雖然被分散成單個細胞,但它們之間的互相影響還是存在的, 而且這種影響對細胞能否存活是非常重要的。在這些細胞之間能產(chǎn)生一些促生長的活性物質, 使細胞彼此互相促進存活和生長。如果接種的細胞密度過低, 細胞之間的促生長作用很小, 雖然營養(yǎng)物質很充足, 也很難使細胞適應從體內的組織環(huán)境到被分散后進入獨立生存環(huán)境的變化過程。 如果接種的細胞密度過大,會導致營養(yǎng)物質供應不足, 代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代。
2)細胞鑒定:細胞角蛋白-18(CK-18)免yi熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細jun、酵母和真jun。
5)細胞生長方式:鋪路石狀細胞,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
1、剪切組織:先將所取得的組織,用D-Hanks或Hanks液清洗,以去除表面血污,并用手術鑷去除黏附的結締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后,用手術刀將組織切成若干小塊,移入青霉素小瓶或小燒杯中,加入適量緩沖液,用彎頭眼科剪,反復剪切組織,直到組織成糊狀,約1mm3大小。靜置片刻后,用吸管吸去上層液體,加入適當?shù)木彌_液再清洗一次。
2、消化分離:消化分離的目的是將細小的組織塊消化分離成細胞團或分散的單個細胞,以利于進一步的培養(yǎng),常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3、培養(yǎng):細胞懸液用計數(shù)板進行細胞計數(shù)。用培養(yǎng)液將細胞數(shù)調整為(2~5)×105 cells/ml,或實驗所需密度,分裝于培養(yǎng)瓶中,使細胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內,5%CO2,37℃靜置培養(yǎng)。一般3~5d,原代培養(yǎng)細胞可以黏附于瓶壁,并伸展開始生長,可補加原培養(yǎng)液量1/2的新培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)2~3d后換液,一般7~14d可以長滿瓶壁,進行傳代。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
2)原代培養(yǎng)時初始培養(yǎng)在組織分散和分離細胞時細胞可能會受到嚴重的損傷。適當增大原代培養(yǎng)接種的細胞密度, 給培養(yǎng)的細胞提供更多的類似于在體內時細胞之間的相互作用, 會極大提高原代培養(yǎng)的細胞在體外存活率。待細胞適應體外環(huán)境后進行傳代培養(yǎng)時再以較低的密度接種和培養(yǎng)。
3)由于細胞之間的相互的內在聯(lián)系被打破,分離細胞在體外培養(yǎng)時經(jīng)歷的生存環(huán)境改變很大,在體外存活和生長的難度相應增加。 對于貼壁依賴性細胞來說,盡快使接種的細胞貼壁,是決定培養(yǎng)能否成功的關鍵。可以在接種后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內培養(yǎng) 3h 到 5h,由于細胞懸液中帶有少量培養(yǎng)液, 細胞即可以維持存活, 又可以很快接觸到培養(yǎng)瓶底壁, 是細胞迅速黏附于底物,待細胞貼壁后,再補足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
3、分離細胞培養(yǎng)法—懸浮型細胞培養(yǎng) 。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人急性原粒細胞白血病細胞 KASUMI-1(STR鑒定正確) |
SC-1 (小鼠胚胎細胞) |
BMP8b Antibody Blocking Peptide |
IM-9 (人外周血B淋ba細胞) |
PC-61 (小鼠雜交瘤細胞CD25) |
Phospho-BLNK(Tyr84) Antibody Blocking Peptide |
NCI-H23 (人非小細胞肺癌細胞) (STR鑒定正確) |
35.1(雜交瘤細胞抗CD2)(STR鑒定正確) |
STK22C Antibody Blocking Peptide |
RT4 (人膀胱移行細胞瘤細胞) (STR鑒定正確) |
COS-1 (非洲綠猴SV40轉化的腎細胞) |
GRB10 Antibody Blocking Peptide |
TE-11 (人食管癌細胞) |
ST (豬睪丸細胞) |
Recombinant human GFRAL protein, C-His-Avi (HEK293) |
MHCC97-L (人低轉移肝癌細胞) |
DT40 (雞淋ba瘤細胞) |
Histone H3 (mono methyl K79) Antibody Blocking Peptide |
COV434 (人卵巢顆粒腫瘤細胞) |
SHZ-88 (大鼠乳腺癌細胞) (種屬鑒定正確) |
PCDH18 Antibody Blocking Peptide |
MKN-7 (人胃癌細胞) (STR鑒定正確) |
MMQ (大鼠垂體瘤細胞) (種屬鑒定正確) |
TRMT6 Antibody Blocking Peptide |
KGN (人卵巢顆粒細胞) (STR鑒定正確) |
大鼠腸靜脈內皮細胞 |
AK8 Antibody Blocking Peptide |
HT-3 (人zi宮頸癌細胞) |
小鼠食管上皮細胞 |
HDAC7 Antibody Blocking Peptide |
TOV-112D (人上皮性卵巢癌細胞) (STR鑒定正確) |
豬脂肪細胞 |
DOCK8 Antibody Blocking Peptide |
NCI-H146 [H146](人小細胞肺癌細胞) (STR鑒定正確) |
兔肺微血管內皮細胞 |
A2LD1/GGACT Antibody Blocking Peptide |
EAC (小鼠艾氏腹水癌細胞) |
人肺成纖維細胞 |
METTL2B Antibody Blocking Peptide |
PA317 (小鼠成纖維細胞) |
大鼠胰腺星狀細胞 |
Phospho-Aurora B (Thr232)/ C (Thr198) Antibody Blocking Peptide |
BNL 1ME A.7R.1 (小鼠肝上皮細胞) |
大鼠胰腺上皮細胞 |
小鼠結腸粘膜上皮細胞CA2 Antibody Blocking Peptide |