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產(chǎn)品規(guī)格:>5×105細胞數(shù)
包裝規(guī)格:1ml凍存細胞懸液或T-25培養(yǎng)瓶
產(chǎn)品名稱 |
小鼠脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮細胞 |
英文名稱 |
Mouse primary choroidal microvascular endothelial cells |
產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
貨號 |
P-X1976 |
公司所有產(chǎn)品均不得用于臨床診斷,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細胞介紹:
脈絡(luò)膜新生血管 (choroidal neovascularization,CNV)已成為眼科學(xué)領(lǐng)域的研究熱點之一,目前多數(shù)體外研究應(yīng)用的是人臍靜脈內(nèi)皮細胞或主動脈內(nèi)皮細胞等容易得到的大血管內(nèi)皮細胞。
1)組織來源于實驗動物的正常眼組織。
我們推薦使用 delf 原代 內(nèi)皮 細胞 培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
注意事項:
1)原代培養(yǎng)的分離細胞在初次接觸體外環(huán)境時,雖然被分散成單個細胞,但它們之間的互相影響還是存在的, 而且這種影響對細胞能否存活是非常重要的。在這些細胞之間能產(chǎn)生一些促生長的活性物質(zhì), 使細胞彼此互相促進存活和生長。如果接種的細胞密度過低, 細胞之間的促生長作用很小, 雖然營養(yǎng)物質(zhì)很充足, 也很難使細胞適應(yīng)從體內(nèi)的組織環(huán)境到被分散后進入獨立生存環(huán)境的變化過程。 如果接種的細胞密度過大,會導(dǎo)致營養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)不足, 代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代。
產(chǎn)品的運輸和保存:
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
由于血管內(nèi)皮細胞具有器官特異性和組織特異性,用大血管內(nèi)皮細胞的研究結(jié)果很難客觀、準(zhǔn)確地解釋 CNV的發(fā)生機制。因此,建立脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮細胞(choroidal microvascular endothelial cells,CEC)體外培養(yǎng)體系,對深入研究CNV相關(guān)ji病具有十分重要的價值。
2)細胞鑒定:CD34或CD31免yi熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細jun、酵母和真jun。
5)細胞生長方式:呈鵝卵石樣,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
2)原代培養(yǎng)時初始培養(yǎng)在組織分散和分離細胞時細胞可能會受到嚴重的損傷。適當(dāng)增大原代培養(yǎng)接種的細胞密度, 給培養(yǎng)的細胞提供更多的類似于在體內(nèi)時細胞之間的相互作用, 會極大提高原代培養(yǎng)的細胞在體外存活率。待細胞適應(yīng)體外環(huán)境后進行傳代培養(yǎng)時再以較低的密度接種和培養(yǎng)。
3)由于細胞之間的相互的內(nèi)在聯(lián)系被打破,分離細胞在體外培養(yǎng)時經(jīng)歷的生存環(huán)境改變很大,在體外存活和生長的難度相應(yīng)增加。 對于貼壁依賴性細胞來說,盡快使接種的細胞貼壁,是決定培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵??梢栽诮臃N后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 3h 到 5h,由于細胞懸液中帶有少量培養(yǎng)液, 細胞即可以維持存活, 又可以很快接觸到培養(yǎng)瓶底壁, 是細胞迅速黏附于底物,待細胞貼壁后,再補足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
3、分離細胞培養(yǎng)法—懸浮型細胞培養(yǎng) 。
操作步驟如下:
1、剪切組織:先將所取得的組織,用D-Hanks或Hanks液清洗,以去除表面血污,并用手術(shù)鑷去除黏附的結(jié)締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后,用手術(shù)刀將組織切成若干小塊,移入青霉素小瓶或小燒杯中,加入適量緩沖液,用彎頭眼科剪,反復(fù)剪切組織,直到組織成糊狀,約1mm3大小。靜置片刻后,用吸管吸去上層液體,加入適當(dāng)?shù)木彌_液再清洗一次。
2、消化分離:消化分離的目的是將細小的組織塊消化分離成細胞團或分散的單個細胞,以利于進一步的培養(yǎng),常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3、培養(yǎng):細胞懸液用計數(shù)板進行細胞計數(shù)。用培養(yǎng)液將細胞數(shù)調(diào)整為(2~5)×105 cells/ml,或?qū)嶒炈杳芏?,分裝于培養(yǎng)瓶中,使細胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內(nèi),5%CO2,37℃靜置培養(yǎng)。一般3~5d,原代培養(yǎng)細胞可以黏附于瓶壁,并伸展開始生長,可補加原培養(yǎng)液量1/2的新培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)2~3d后換液,一般7~14d可以長滿瓶壁,進行傳代。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人胚肺細胞 MRC-5(STR鑒定正確) |
大鼠原代輸卵管平滑肌細胞 |
TBX3 Antibody Blocking Peptide |
兔原代主動脈平滑肌細胞 |
人原代肺巨噬細胞 |
RABAC1 Antibody Blocking Peptide |
小鼠原代zi宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞 |
大鼠原代肺成纖維細胞 |
SPATA20 Antibody Blocking Peptide |
兔原代肝kupffer細胞 |
小鼠原代胰腺導(dǎo)管上皮細胞 |
IDUA Antibody Blocking Peptide |
大鼠原代臍帶間充質(zhì)干細胞 |
小鼠原代膀胱基質(zhì)成纖維細胞 |
CST5 Antibody Blocking Peptide |
大鼠原代α-SMA陽性 腎周肌成纖維細胞 |
兔原代結(jié)腸成纖維細胞 |
Recombinant human Procalcitonin, N-His |
兔原代胰島細胞 |
人原代小腸微血管內(nèi)皮細胞 |
RNF19B Antibody Blocking Peptide |
鴨原代腦微血管內(nèi)皮細胞 |
兔卵巢間質(zhì)細胞 |
FRMD8 Antibody Blocking Peptide |
小鼠原代膽囊上皮細胞 |
人卵巢間質(zhì)細胞 |
PCBP2 Antibody Blocking Peptide |
小鼠原代脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮細胞 |
大鼠海馬神經(jīng)元細胞 |
UBQLNL Antibody Blocking Peptide |
兔原代下丘腦神經(jīng)元細胞 |
綿羊卵巢顆粒細胞 |
TMTC1 Antibody Blocking Peptide |
小鼠原代脾淋ba細胞 |
小鼠zi宮內(nèi)膜上皮細胞 |
CIAPIN1 Antibody Blocking Peptide |
大鼠原代垂體細胞 |
大鼠脾源性內(nèi)皮祖細胞 |
5HT5A receptor/SR-5A Antibody Blocking Peptide |
大鼠原代小腸隱窩上皮細胞 |
大鼠卵泡膜細胞 |
KIF1B Antibody Blocking Peptide |
兔原代腦皮層神經(jīng)元細胞 |
豬胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細胞 |
小鼠脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮細胞UBE2C Antibody Blocking Peptide |