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公司所有產(chǎn)品均不得用于臨床診斷,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
產(chǎn)品名稱 |
小鼠氣管平滑肌細(xì)胞 |
英文名稱 |
Mouse primary tracheal smooth muscle cells |
產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
貨號(hào) |
P-X1766 |
產(chǎn)品規(guī)格:>5×105細(xì)胞數(shù)
包裝規(guī)格:1ml凍存細(xì)胞懸液或T-25培養(yǎng)瓶
細(xì)胞介紹:
xiao喘是一種常見的氣道慢性炎癥性ji病,目前我國(guó)有約 2000 萬(wàn)人罹患xiao喘。近些年,由于霧霾等空氣質(zhì)量與環(huán)境污染程度的日益惡劣,呼吸系統(tǒng)ji病也逐漸成為了全世界范圍影響人類健康嚴(yán)重的慢性ji病之一,據(jù)世界衛(wèi)生組織預(yù)測(cè),到2025年,世界上將會(huì)有 4 億人患上xiao喘。
xiao喘發(fā)病癥狀眾多,早期表現(xiàn)為過(guò)敏性炎癥,后期由于氣管平滑肌增生,阻塞氣管,導(dǎo)致氣道狹窄、氣道高反應(yīng)及氣道重塑,患者出現(xiàn)胸悶、氣喘等癥狀,嚴(yán)重時(shí)危及生命。因此,對(duì)xiao喘的發(fā)病機(jī)理與zhi療的研究是至關(guān)重要的。
在對(duì)xiao喘發(fā)病機(jī)制的研究中,氣管平滑肌是針對(duì)氣道阻塞性癥狀的主要研究目標(biāo)之一,針對(duì)氣 管 平 滑 肌 細(xì) 胞 ( airway smooth muscle cells,ASMCs) 的形態(tài)學(xué)觀察與細(xì)胞增殖速率的測(cè)量是在細(xì)胞生物學(xué)水平研究xiao喘發(fā)病機(jī)制的常用手段。
1)組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常氣管組織。
2)細(xì)胞鑒定:平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)免yi熒光染色為陽(yáng)性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)jun、酵母和真jun。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:長(zhǎng)梭形細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
我們推薦使用 原代 平滑肌 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
操作步驟如下:
1、剪切組織:先將所取得的組織,用D-Hanks或Hanks液清洗,以去除表面血污,并用手術(shù)鑷去除黏附的結(jié)締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后,用手術(shù)刀將組織切成若干小塊,移入青霉素小瓶或小燒杯中,加入適量緩沖液,用彎頭眼科剪,反復(fù)剪切組織,直到組織成糊狀,約1mm3大小。靜置片刻后,用吸管吸去上層液體,加入適當(dāng)?shù)木彌_液再清洗一次。
2、消化分離:消化分離的目的是將細(xì)小的組織塊消化分離成細(xì)胞團(tuán)或分散的單個(gè)細(xì)胞,以利于進(jìn)一步的培養(yǎng),常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3、培養(yǎng):細(xì)胞懸液用計(jì)數(shù)板進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。用培養(yǎng)液將細(xì)胞數(shù)調(diào)整為(2~5)×105 cells/ml,或?qū)嶒?yàn)所需密度,分裝于培養(yǎng)瓶中,使細(xì)胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內(nèi),5%CO2,37℃靜置培養(yǎng)。一般3~5d,原代培養(yǎng)細(xì)胞可以黏附于瓶壁,并伸展開始生長(zhǎng),可補(bǔ)加原培養(yǎng)液量1/2的新培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)2~3d后換液,一般7~14d可以長(zhǎng)滿瓶壁,進(jìn)行傳代。
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
注意事項(xiàng):
1)原代培養(yǎng)的分離細(xì)胞在初次接觸體外環(huán)境時(shí),雖然被分散成單個(gè)細(xì)胞,但它們之間的互相影響還是存在的, 而且這種影響對(duì)細(xì)胞能否存活是非常重要的。在這些細(xì)胞之間能產(chǎn)生一些促生長(zhǎng)的活性物質(zhì), 使細(xì)胞彼此互相促進(jìn)存活和生長(zhǎng)。如果接種的細(xì)胞密度過(guò)低, 細(xì)胞之間的促生長(zhǎng)作用很小, 雖然營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)很充足, 也很難使細(xì)胞適應(yīng)從體內(nèi)的組織環(huán)境到被分散后進(jìn)入獨(dú)立生存環(huán)境的變化過(guò)程。 如果接種的細(xì)胞密度過(guò)大,會(huì)導(dǎo)致營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)不足, 代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代。
2)原代培養(yǎng)時(shí)初始培養(yǎng)在組織分散和分離細(xì)胞時(shí)細(xì)胞可能會(huì)受到嚴(yán)重的損傷。適當(dāng)增大原代培養(yǎng)接種的細(xì)胞密度, 給培養(yǎng)的細(xì)胞提供更多的類似于在體內(nèi)時(shí)細(xì)胞之間的相互作用, 會(huì)極大提高原代培養(yǎng)的細(xì)胞在體外存活率。待細(xì)胞適應(yīng)體外環(huán)境后進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí)再以較低的密度接種和培養(yǎng)。
3)由于細(xì)胞之間的相互的內(nèi)在聯(lián)系被打破,分離細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)經(jīng)歷的生存環(huán)境改變很大,在體外存活和生長(zhǎng)的難度相應(yīng)增加。 對(duì)于貼壁依賴性細(xì)胞來(lái)說(shuō),盡快使接種的細(xì)胞貼壁,是決定培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵。可以在接種后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 3h 到 5h,由于細(xì)胞懸液中帶有少量培養(yǎng)液, 細(xì)胞即可以維持存活, 又可以很快接觸到培養(yǎng)瓶底壁, 是細(xì)胞迅速黏附于底物,待細(xì)胞貼壁后,再補(bǔ)足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
3、分離細(xì)胞培養(yǎng)法—懸浮型細(xì)胞培養(yǎng) 。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人眼小梁網(wǎng)細(xì)胞HTMC (STR鑒定正確) |
人zi宮瘤細(xì)胞 |
FAM120A Antibody Blocking Peptide |
人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞 |
兔肺微血管周細(xì)胞 |
OR52I1 Antibody Blocking Peptide |
豬腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞 |
兔乳腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞 |
KCNE2 Antibody Blocking Peptide |
人結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞 |
大鼠牙周膜成纖維細(xì)胞 |
GPR37L1 Antibody Blocking Peptide |
大鼠羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞 |
小鼠腎小管上皮細(xì)胞 |
C4orf17 Antibody Blocking Peptide |
兔肺大動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞 |
兔鼻腔粘膜上皮細(xì)胞 |
SHISA3 Antibody Blocking Peptide |
人淋ba管成纖維細(xì)胞 |
人外根鞘細(xì)胞 |
EGR4 Antibody Blocking Peptide |
兔主動(dòng)脈弓內(nèi)皮細(xì)胞 |
小鼠海馬神經(jīng)干細(xì)胞 |
FKBP1A Antibody Blocking Peptide |
小鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞 |
人肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞 |
EEF1G Antibody Blocking Peptide |
大鼠前列腺上皮細(xì)胞 |
小鼠膀胱間質(zhì)細(xì)胞 |
ERMN Antibody Blocking Peptide |
人宮頸癌細(xì)胞 |
大鼠腹膜間皮細(xì)胞 |
phospho-G3BP1(Ser232) Antibody Blocking Peptide |
豬心臟瓣膜內(nèi)皮細(xì)胞 |
兔腸間質(zhì)細(xì)胞 |
SPP2 Antibody Blocking Peptide |
人頸動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 |
大鼠NK細(xì)胞 |
CHCHD10 Antibody Blocking Peptide |
小鼠下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞 |
兔海馬神經(jīng)元細(xì)胞 |
DKK3 Antibody Blocking Peptide |
兔主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 |
小鼠α-SMA陽(yáng)性 腎周肌成纖維細(xì)胞 |
小鼠氣管平滑肌細(xì)胞MCTP2 Antibody Blocking Peptide |