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公司所有產(chǎn)品均不得用于臨床診斷,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
產(chǎn)品名稱 |
兔骨膜干細(xì)胞 |
英文名稱 |
Rabbit primary periosteal stem cells |
產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
貨號 |
P-X2166 |
產(chǎn)品規(guī)格:>5×105細(xì)胞數(shù)
包裝規(guī)格:1ml凍存細(xì)胞懸液或T-25培養(yǎng)瓶
細(xì)胞介紹:
骨膜是覆蓋在骨質(zhì)表面的一層結(jié)締組織。骨膜通過夏皮式纖維錨定在骨質(zhì)上,充當(dāng)外部肌肉組織和內(nèi)部骨質(zhì)的連接橋梁,這種結(jié)構(gòu)有助于維持骨膜的完整性。
1)細(xì)胞來源于實驗動物正常關(guān)節(jié)骨膜組織。
我們推薦使用 DELF 原代間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
注意事項:
1)原代培養(yǎng)的分離細(xì)胞在初次接觸體外環(huán)境時,雖然被分散成單個細(xì)胞,但它們之間的互相影響還是存在的, 而且這種影響對細(xì)胞能否存活是非常重要的。在這些細(xì)胞之間能產(chǎn)生一些促生長的活性物質(zhì), 使細(xì)胞彼此互相促進(jìn)存活和生長。如果接種的細(xì)胞密度過低, 細(xì)胞之間的促生長作用很小, 雖然營養(yǎng)物質(zhì)很充足, 也很難使細(xì)胞適應(yīng)從體內(nèi)的組織環(huán)境到被分散后進(jìn)入獨立生存環(huán)境的變化過程。 如果接種的細(xì)胞密度過大,會導(dǎo)致營養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)不足, 代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代。
產(chǎn)品的運輸和保存:
視天氣狀況和運輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
骨膜由兩部分組成,外層疏松的纖維層與內(nèi)層致密的細(xì)胞層,纖維層中含有成纖維細(xì)胞、膠原纖維、彈力纖維及微管等。細(xì)胞層中多為骨膜源干細(xì)胞,這種干細(xì)胞與骨髓來源的間充質(zhì)干細(xì)胞類似,具有多向分化的潛能。
骨質(zhì)修復(fù)、重塑和更新與骨膜中的干細(xì)胞密切相關(guān)。在正常生理狀況下,骨膜組織發(fā)揮著維持骨質(zhì)更新及重塑的作用,其中的干細(xì)胞既可以通過膜內(nèi)成骨方式分化為成骨細(xì)胞,也可通過軟骨內(nèi)成骨方式分化為軟骨細(xì)胞。
2)細(xì)胞鑒定:CD90或CD73免yi熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)jun、酵母和真jun。
5)細(xì)胞生長方式:成纖維樣細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
2)原代培養(yǎng)時初始培養(yǎng)在組織分散和分離細(xì)胞時細(xì)胞可能會受到嚴(yán)重的損傷。適當(dāng)增大原代培養(yǎng)接種的細(xì)胞密度, 給培養(yǎng)的細(xì)胞提供更多的類似于在體內(nèi)時細(xì)胞之間的相互作用, 會極大提高原代培養(yǎng)的細(xì)胞在體外存活率。待細(xì)胞適應(yīng)體外環(huán)境后進(jìn)行傳代培養(yǎng)時再以較低的密度接種和培養(yǎng)。
3)由于細(xì)胞之間的相互的內(nèi)在聯(lián)系被打破,分離細(xì)胞在體外培養(yǎng)時經(jīng)歷的生存環(huán)境改變很大,在體外存活和生長的難度相應(yīng)增加。 對于貼壁依賴性細(xì)胞來說,盡快使接種的細(xì)胞貼壁,是決定培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵??梢栽诮臃N后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 3h 到 5h,由于細(xì)胞懸液中帶有少量培養(yǎng)液, 細(xì)胞即可以維持存活, 又可以很快接觸到培養(yǎng)瓶底壁, 是細(xì)胞迅速黏附于底物,待細(xì)胞貼壁后,再補足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
3、分離細(xì)胞培養(yǎng)法—懸浮型細(xì)胞培養(yǎng) 。
操作步驟如下:
1、剪切組織:先將所取得的組織,用D-Hanks或Hanks液清洗,以去除表面血污,并用手術(shù)鑷去除黏附的結(jié)締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后,用手術(shù)刀將組織切成若干小塊,移入青霉素小瓶或小燒杯中,加入適量緩沖液,用彎頭眼科剪,反復(fù)剪切組織,直到組織成糊狀,約1mm3大小。靜置片刻后,用吸管吸去上層液體,加入適當(dāng)?shù)木彌_液再清洗一次。
2、消化分離:消化分離的目的是將細(xì)小的組織塊消化分離成細(xì)胞團(tuán)或分散的單個細(xì)胞,以利于進(jìn)一步的培養(yǎng),常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3、培養(yǎng):細(xì)胞懸液用計數(shù)板進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。用培養(yǎng)液將細(xì)胞數(shù)調(diào)整為(2~5)×105 cells/ml,或?qū)嶒炈杳芏?,分裝于培養(yǎng)瓶中,使細(xì)胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內(nèi),5%CO2,37℃靜置培養(yǎng)。一般3~5d,原代培養(yǎng)細(xì)胞可以黏附于瓶壁,并伸展開始生長,可補加原培養(yǎng)液量1/2的新培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)2~3d后換液,一般7~14d可以長滿瓶壁,進(jìn)行傳代。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔表皮干細(xì)胞 |
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Glutaredoxin 1 Antibody Blocking Peptide |
兔成骨細(xì)胞 |
小鼠腹膜間皮細(xì)胞 |
phospho-Huntingtin (Ser434) Antibody Blocking Peptide |
大鼠膀胱平滑肌細(xì)胞 |
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TAS2R50 Antibody Blocking Peptide |
人腎小球系膜細(xì)胞 |
小鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)細(xì)胞 |
Phospho-STIP1 (Ser103) Antibody Blocking Peptide |
人腎足突細(xì)胞 |
小鼠微血管周細(xì)胞 |
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大鼠上皮細(xì)胞 |
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人大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 |
小鼠腎小球上皮細(xì)胞 |
KIAA1161 Antibody Blocking Peptide |
大鼠腦動脈血管內(nèi)皮細(xì)胞 |
人肺腺癌成纖維細(xì)胞 |
C6orf120 Antibody Blocking Peptide |
人皮膚肥大細(xì)胞 |
大鼠壁成纖維細(xì)胞 |
FRMPD2 Antibody Blocking Peptide |
大鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞 |
大鼠主動脈外膜成纖維細(xì)胞 |
GBF1 Antibody Blocking Peptide |
大鼠角膜成纖維細(xì)胞 |
人骨骼肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞 |
SYVN1 Antibody Blocking Peptide |
小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 |
人肺小動脈平滑肌細(xì)胞 |
Phospho-SEK1/MKK4 (Ser257) Antibody Blocking Peptide |
小鼠神經(jīng)干細(xì)胞 |
大鼠腦膜成纖維細(xì)胞 |
FLYWCH2 Antibody Blocking Peptide |
小鼠椎間盤髓核細(xì)胞 |
小鼠浦肯野細(xì)胞 |
兔骨膜干細(xì)胞MED4 Antibody Blocking Peptide |