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推薦培養(yǎng)基：
我們推薦使用 Delf原代 上皮 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
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產(chǎn)品名稱 |
大鼠角膜上皮細(xì)胞 |
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英文名稱 |
Primary corneal epithelial cells of rats |
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產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
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貨號(hào) |
P-X1724 |
公司所有產(chǎn)品均不得用于臨床診斷，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細(xì)胞介紹：
角膜位于眼球前壁的一層透明膜，約占纖維膜的前 1/6，從后面看角膜呈正圓形，從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不同，中央部薄。角膜分為五層，由前向后依次為：上皮細(xì)胞層、前彈力層、基質(zhì)層、后彈力層、內(nèi)皮細(xì)胞層。
1)組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織。
操作步驟如下：
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
注意事項(xiàng)：
1)原代培養(yǎng)的分離細(xì)胞在初次接觸體外環(huán)境時(shí)，雖然被分散成單個(gè)細(xì)胞，但它們之間的互相影響還是存在的， 而且這種影響對(duì)細(xì)胞能否存活是非常重要的。在這些細(xì)胞之間能產(chǎn)生一些促生長(zhǎng)的活性物質(zhì)， 使細(xì)胞彼此互相促進(jìn)存活和生長(zhǎng)。如果接種的細(xì)胞密度過低， 細(xì)胞之間的促生長(zhǎng)作用很小， 雖然營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)很充足， 也很難使細(xì)胞適應(yīng)從體內(nèi)的組織環(huán)境到被分散后進(jìn)入獨(dú)立生存環(huán)境的變化過程。 如果接種的細(xì)胞密度過大，會(huì)導(dǎo)致營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)不足， 代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代。
角膜上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)對(duì)研究角膜的生理學(xué)、病理學(xué)、學(xué)以及分子生物學(xué)都是極為重要的手段，常用于研究細(xì)胞代謝產(chǎn)物、病毒感染、各種生長(zhǎng)因子和yao物對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響。
2)細(xì)胞鑒定：廣譜角蛋白(PCK)免yi熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)jun、酵母和真jun。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：上皮樣，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
1、剪切組織：先將所取得的組織，用D-Hanks或Hanks液清洗，以去除表面血污，并用手術(shù)鑷去除黏附的結(jié)締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后，用手術(shù)刀將組織切成若干小塊，移入青霉素小瓶或小燒杯中，加入適量緩沖液，用彎頭眼科剪，反復(fù)剪切組織，直到組織成糊狀，約1mm3大小。靜置片刻后，用吸管吸去上層液體，加入適當(dāng)?shù)木彌_液再清洗一次。
2、消化分離：消化分離的目的是將細(xì)小的組織塊消化分離成細(xì)胞團(tuán)或分散的單個(gè)細(xì)胞，以利于進(jìn)一步的培養(yǎng)，常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3、培養(yǎng)：細(xì)胞懸液用計(jì)數(shù)板進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。用培養(yǎng)液將細(xì)胞數(shù)調(diào)整為（2～5）×105 cells／ml，或?qū)嶒?yàn)所需密度，分裝于培養(yǎng)瓶中，使細(xì)胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內(nèi)，5％CO2，37℃靜置培養(yǎng)。一般3～5d，原代培養(yǎng)細(xì)胞可以黏附于瓶壁，并伸展開始生長(zhǎng)，可補(bǔ)加原培養(yǎng)液量1／2的新培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)2～3d后換液，一般7～14d可以長(zhǎng)滿瓶壁，進(jìn)行傳代。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
2)原代培養(yǎng)時(shí)初始培養(yǎng)在組織分散和分離細(xì)胞時(shí)細(xì)胞可能會(huì)受到嚴(yán)重的損傷。適當(dāng)增大原代培養(yǎng)接種的細(xì)胞密度， 給培養(yǎng)的細(xì)胞提供更多的類似于在體內(nèi)時(shí)細(xì)胞之間的相互作用， 會(huì)極大提高原代培養(yǎng)的細(xì)胞在體外存活率。待細(xì)胞適應(yīng)體外環(huán)境后進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí)再以較低的密度接種和培養(yǎng)。
3)由于細(xì)胞之間的相互的內(nèi)在聯(lián)系被打破，分離細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)經(jīng)歷的生存環(huán)境改變很大，在體外存活和生長(zhǎng)的難度相應(yīng)增加。 對(duì)于貼壁依賴性細(xì)胞來說，盡快使接種的細(xì)胞貼壁，是決定培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵?？梢栽诮臃N后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 3h 到 5h，由于細(xì)胞懸液中帶有少量培養(yǎng)液， 細(xì)胞即可以維持存活， 又可以很快接觸到培養(yǎng)瓶底壁， 是細(xì)胞迅速黏附于底物，待細(xì)胞貼壁后，再補(bǔ)足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
3、分離細(xì)胞培養(yǎng)法—懸浮型細(xì)胞培養(yǎng) 。
公司正在出售的產(chǎn)品：
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SK-N-DZ人成神經(jīng)瘤細(xì)胞 |
SDOW-17小鼠雜交瘤 |
AIFM Antibody Blocking Peptide |
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原代卵泡膜細(xì)胞培養(yǎng)體系 |
V79倉(cāng)鼠肺細(xì)胞 |
ADRB1 Antibody Blocking Peptide |
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L15基礎(chǔ)培養(yǎng)基 |
NR8383大鼠肺泡巨噬細(xì)胞 |
CRACR2A Antibody Blocking Peptide |
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雞血清 |
PED 豬內(nèi)皮細(xì)胞 |
GSTCD Antibody Blocking Peptide |
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D-蟲熒光素鈉鹽 |
8305C人甲狀腺癌細(xì)胞8305C（未分化） |
NFKBIE Antibody Blocking Peptide |
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胰島素-轉(zhuǎn)鐵蛋白-硒添加劑 |
A549+RFP 人肺癌細(xì)胞+RFP |
GRIN2A Antibody Blocking Peptide |
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細(xì)胞組織運(yùn)輸保存液 |
BT-474人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞 |
DEFB112 Antibody Blocking Peptide |
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人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子B3 |
CFPAC-1人胰腺癌細(xì)胞 |
LAMA3/Laminin 5 alpha 3 Antibody Blocking Peptide |
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人白細(xì)胞介素10 |
LS180人結(jié)直腸癌細(xì)胞 |
RBM11 Antibody Blocking Peptide |
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細(xì)胞污染高效劑，2000 × |
KB人口腔表皮癌細(xì)胞 |
SARAF Antibody Blocking Peptide |
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細(xì)胞培養(yǎng)皿 |
Eca-109人食管癌細(xì)胞 |
CLEC11A Antibody Blocking Peptide |
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4T1小鼠乳腺癌細(xì)胞 |
HCC1937人乳腺癌細(xì)胞 |
Recombinant SARS-Cov-2 3C-like Proteinase, His |
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E14小鼠胚胎干細(xì)胞 |
HET-1A人食管上皮細(xì)胞 |
Recombinant human CD80 protein, C-His-Avi (HEK293) |
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LLC小鼠肺癌細(xì)胞 |
HPAC人胰腺癌細(xì)胞 |
REM1 Antibody Blocking Peptide |
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NCTC1469（NCTC CLONE 1469）小鼠正常肝細(xì)胞 |
HUVEC+RFP人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞永生化+RFP |
大鼠角膜上皮細(xì)胞phospho-GABBR2 (Ser783) Antibody Blocking Peptide |