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產(chǎn)品的運輸和保存:
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
產(chǎn)品名稱 |
大鼠腦血管周細胞 |
英文名稱 |
Primary cerebral vascular pericytes in rats |
產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
貨號 |
P-X1699 |
公司所有產(chǎn)品均不得用于臨床診斷,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細胞介紹:
腦血管周細胞分布于腦組織的微血管系統(tǒng)中,調(diào)節(jié)血管形成、穩(wěn)定和功能的關(guān)鍵因素。周細胞典型的特征是有一個突出的核,核周圍胞漿較少,有許多平行于微血管長軸的突起,這些突起逐漸變細并包繞微血管腔,起到對管腔的支持作用。
1)組織來源于實驗動物的正常腦組織。
我們推薦使用 Delf原代 周 細胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
操作步驟如下:
注意事項:
1)原代培養(yǎng)的分離細胞在初次接觸體外環(huán)境時,雖然被分散成單個細胞,但它們之間的互相影響還是存在的, 而且這種影響對細胞能否存活是非常重要的。在這些細胞之間能產(chǎn)生一些促生長的活性物質(zhì), 使細胞彼此互相促進存活和生長。如果接種的細胞密度過低, 細胞之間的促生長作用很小, 雖然營養(yǎng)物質(zhì)很充足, 也很難使細胞適應(yīng)從體內(nèi)的組織環(huán)境到被分散后進入獨立生存環(huán)境的變化過程。 如果接種的細胞密度過大,會導(dǎo)致營養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)不足, 代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代。
同時,一個周細胞可以通過伸展的突起與微循環(huán)中的多個毛xi血管接觸。此外,周細胞和內(nèi)皮細胞間的相互作用在血管新生中具有極為重要的作用。
2)細胞鑒定:平滑肌肌動蛋白(α-SMA)免yi熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細jun、酵母和真jun。
5)細胞生長方式:長梭形細胞,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
1、剪切組織:先將所取得的組織,用D-Hanks或Hanks液清洗,以去除表面血污,并用手術(shù)鑷去除黏附的結(jié)締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后,用手術(shù)刀將組織切成若干小塊,移入青霉素小瓶或小燒杯中,加入適量緩沖液,用彎頭眼科剪,反復(fù)剪切組織,直到組織成糊狀,約1mm3大小。靜置片刻后,用吸管吸去上層液體,加入適當?shù)木彌_液再清洗一次。
2、消化分離:消化分離的目的是將細小的組織塊消化分離成細胞團或分散的單個細胞,以利于進一步的培養(yǎng),常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3、培養(yǎng):細胞懸液用計數(shù)板進行細胞計數(shù)。用培養(yǎng)液將細胞數(shù)調(diào)整為(2~5)×105 cells/ml,或?qū)嶒炈杳芏?,分裝于培養(yǎng)瓶中,使細胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內(nèi),5%CO2,37℃靜置培養(yǎng)。一般3~5d,原代培養(yǎng)細胞可以黏附于瓶壁,并伸展開始生長,可補加原培養(yǎng)液量1/2的新培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)2~3d后換液,一般7~14d可以長滿瓶壁,進行傳代。
2)原代培養(yǎng)時初始培養(yǎng)在組織分散和分離細胞時細胞可能會受到嚴重的損傷。適當增大原代培養(yǎng)接種的細胞密度, 給培養(yǎng)的細胞提供更多的類似于在體內(nèi)時細胞之間的相互作用, 會極大提高原代培養(yǎng)的細胞在體外存活率。待細胞適應(yīng)體外環(huán)境后進行傳代培養(yǎng)時再以較低的密度接種和培養(yǎng)。
3)由于細胞之間的相互的內(nèi)在聯(lián)系被打破,分離細胞在體外培養(yǎng)時經(jīng)歷的生存環(huán)境改變很大,在體外存活和生長的難度相應(yīng)增加。 對于貼壁依賴性細胞來說,盡快使接種的細胞貼壁,是決定培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵??梢栽诮臃N后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 3h 到 5h,由于細胞懸液中帶有少量培養(yǎng)液, 細胞即可以維持存活, 又可以很快接觸到培養(yǎng)瓶底壁, 是細胞迅速黏附于底物,待細胞貼壁后,再補足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
3、分離細胞培養(yǎng)法—懸浮型細胞培養(yǎng) 。
公司正在出售的產(chǎn)品:
PC-12腎上腺嗜鉻細胞瘤 |
人肺癌腺癌細胞HCC1833 (STR鑒定正確) |
CYBA Antibody Blocking Peptide |
兔頸靜脈內(nèi)皮細胞 |
人非小細胞肺癌細胞NCI-H1395(STR鑒定正確) |
ZBTB22/ZNF297 Antibody Blocking Peptide |
人低分化肺腺癌細胞SK-LU-1(STR鑒定正確) |
小鼠乳腺癌細胞轉(zhuǎn)染4T1+OVA(STR鑒定正確) |
FGF23 Antibody Blocking Peptide |
小鼠胚胎纖維細胞STO(種屬鑒定) |
人視網(wǎng)膜母細胞瘤WERI-Rb-1(STR鑒定正確) |
Complement C5 beta chain Antibody Blocking Peptide |
大鼠外根鞘細胞 |
小鼠乳腺癌細胞 E0771(種屬鑒定) |
MBL2 Antibody Blocking Peptide |
人骨肉瘤細胞HOS(STR鑒定正確) |
豬肺泡巨噬細胞3D4/21(種屬鑒定) |
GMPPA Antibody Blocking Peptide |
人胃粘膜細胞GES-1(STR鑒定正確) |
人骨髓漿細胞瘤株AMO1(STR鑒定正確) |
pre S1/S2 protein Antibody Blocking Peptide |
人喉表皮樣癌細胞HEp-2(STR鑒定正確) |
小鼠黑色素瘤帶熒光素酶B16-F10+luc(種屬鑒定) |
LCN10 Antibody Blocking Peptide |
大鼠肝細胞IAR20(種屬鑒定) |
人口腔鱗狀細胞WSU-HN30(STR鑒定正確) |
RRAGA + RRAGB Antibody Blocking Peptide |
人結(jié)腸腺癌細胞LS1034 (STR鑒定正確) |
大鼠腸間質(zhì)細胞 |
IFNA1 Antibody Blocking Peptide |
人肺癌細胞DMS53(STR鑒定正確) |
正常大鼠腎細胞(EGF受體陽性)NRK-49F(種屬鑒定) |
Tetanus toxin light chain Antibody Blocking Peptide |
人卵巢癌腺癌細胞NIH:OVCAR-3(STR鑒定正確) |
人胃癌細胞MKN-7(STR鑒定正確) |
phospho-CK18(Ser60) Antibody Blocking Peptide |
人盲腸腺癌細胞(未分化)Hce-8693(STR鑒定正確) |
人尤文氏肉瘤RD-ES(STR鑒定正確) |
HORMAD1 Antibody Blocking Peptide |
小鼠樹突狀細胞肉瘤細胞DCS(種屬鑒定) |
人腎母細胞瘤細胞SK-NEP-1(STR鑒定正確) |
CD176 Antibody Blocking Peptide |
小鼠膠質(zhì)瘤細胞帶綠色熒光GL261/GFP(種屬鑒定) |
人非小細胞肺癌細胞HCC-44(STR鑒定正確) |
大鼠腦血管周細胞CREBL2 Antibody Blocking Peptide |