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細(xì)胞特性：
1)組織來源于實驗動物的正常腎組織。
2)細(xì)胞鑒定：Ⅷ因子相關(guān)抗原（Factor Ⅷ）免yi熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)jun、酵母和真jun。
5)細(xì)胞生長方式：圓形，多角形細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
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產(chǎn)品名稱 |
大鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞 |
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英文名稱 |
Rat glomerular endothelial cells |
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產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
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貨號 |
P-X1589 |
公司所有產(chǎn)品均不得用于臨床診斷，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細(xì)胞介紹：
腎小球是腎元中的用于將血液過濾**原尿的一團毛細(xì)血叢。在腎小球內(nèi)，微血管受到高壓，而加速了超濾作用的進行。腎小球過濾膜從內(nèi)到外有三層：內(nèi)層、中層和外層。其中，內(nèi)層為內(nèi)皮細(xì)胞層，附著在腎小球基底膜內(nèi)。
我們推薦使用 Delf 原代內(nèi)皮 細(xì)胞 培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
操作步驟如下：
視天氣狀況和運輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
注意事項：
1)原代培養(yǎng)的分離細(xì)胞在初次接觸體外環(huán)境時，雖然被分散成單個細(xì)胞，但它們之間的互相影響還是存在的， 而且這種影響對細(xì)胞能否存活是非常重要的。在這些細(xì)胞之間能產(chǎn)生一些促生長的活性物質(zhì)， 使細(xì)胞彼此互相促進存活和生長。如果接種的細(xì)胞密度過低， 細(xì)胞之間的促生長作用很小， 雖然營養(yǎng)物質(zhì)很充足， 也很難使細(xì)胞適應(yīng)從體內(nèi)的組織環(huán)境到被分散后進入獨立生存環(huán)境的變化過程。 如果接種的細(xì)胞密度過大，會導(dǎo)致營養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)不足， 代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代。
1、剪切組織：先將所取得的組織，用D-Hanks或Hanks液清洗，以去除表面血污，并用手術(shù)鑷去除黏附的結(jié)締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后，用手術(shù)刀將組織切成若干小塊，移入青霉素小瓶或小燒杯中，加入適量緩沖液，用彎頭眼科剪，反復(fù)剪切組織，直到組織成糊狀，約1mm3大小。靜置片刻后，用吸管吸去上層液體，加入適當(dāng)?shù)木彌_液再清洗一次。
2、消化分離：消化分離的目的是將細(xì)小的組織塊消化分離成細(xì)胞團或分散的單個細(xì)胞，以利于進一步的培養(yǎng)，常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3、培養(yǎng)：細(xì)胞懸液用計數(shù)板進行細(xì)胞計數(shù)。用培養(yǎng)液將細(xì)胞數(shù)調(diào)整為（2～5）×105 cells／ml，或?qū)嶒炈杳芏?，分裝于培養(yǎng)瓶中，使細(xì)胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內(nèi)，5％CO2，37℃靜置培養(yǎng)。一般3～5d，原代培養(yǎng)細(xì)胞可以黏附于瓶壁，并伸展開始生長，可補加原培養(yǎng)液量1／2的新培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)2～3d后換液，一般7～14d可以長滿瓶壁，進行傳代。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進行常溫運輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
2)原代培養(yǎng)時初始培養(yǎng)在組織分散和分離細(xì)胞時細(xì)胞可能會受到嚴(yán)重的損傷。適當(dāng)增大原代培養(yǎng)接種的細(xì)胞密度， 給培養(yǎng)的細(xì)胞提供更多的類似于在體內(nèi)時細(xì)胞之間的相互作用， 會極大提高原代培養(yǎng)的細(xì)胞在體外存活率。待細(xì)胞適應(yīng)體外環(huán)境后進行傳代培養(yǎng)時再以較低的密度接種和培養(yǎng)。
3)由于細(xì)胞之間的相互的內(nèi)在聯(lián)系被打破，分離細(xì)胞在體外培養(yǎng)時經(jīng)歷的生存環(huán)境改變很大，在體外存活和生長的難度相應(yīng)增加。 對于貼壁依賴性細(xì)胞來說，盡快使接種的細(xì)胞貼壁，是決定培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵?？梢栽诮臃N后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 3h 到 5h，由于細(xì)胞懸液中帶有少量培養(yǎng)液， 細(xì)胞即可以維持存活， 又可以很快接觸到培養(yǎng)瓶底壁， 是細(xì)胞迅速黏附于底物，待細(xì)胞貼壁后，再補足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
3、分離細(xì)胞培養(yǎng)法—懸浮型細(xì)胞培養(yǎng) 。
公司正在出售的產(chǎn)品：
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人原代食道上皮細(xì)胞 |
SW1463直腸癌 |
AOC1 Antibody Blocking Peptide |
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MC-38/RFP小鼠結(jié)腸癌帶紅色熒光 |
HEC-1-Azi宮癌 |
Phospho-A Raf (Tyr301/302) Antibody Blocking Peptide |
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G422/GFP小鼠腦神經(jīng)膠質(zhì)母細(xì)胞 |
NP69-SV40T永生化人鼻咽上皮細(xì)胞 |
PADI6 Antibody Blocking Peptide |
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MouseS小鼠皮膚成纖維細(xì)胞 |
GP2-293Luc人胚腎上皮包裝細(xì)胞 |
FBXO42 Antibody Blocking Peptide |
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NSC34不能出售小鼠神經(jīng)元細(xì)胞 |
TU 686喉癌細(xì)胞 |
ASTE1 Antibody Blocking Peptide |
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Alpha TC1 clone6小鼠胰島素瘤胰島a細(xì)胞 |
4T1/GFP4T1/GFP 小鼠乳腺癌細(xì)胞帶綠色熒光 |
Recombinant human TNF-Alpha protein, GST |
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MN9D小鼠中腦多巴胺能神經(jīng)元細(xì)胞 |
SUNE-1亞株6-10B |
ARID3A Antibody Blocking Peptide |
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NCI-H1618小細(xì)胞肺癌 |
兔原代卵巢間質(zhì)細(xì)胞 |
KLHL7 Antibody Blocking Peptide |
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NCI-H69小細(xì)胞肺癌 |
人原代卵巢間質(zhì)細(xì)胞 |
NCF4 Antibody Blocking Peptide |
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Hs 766.T胰腺癌 |
大鼠原代海馬神經(jīng)元細(xì)胞 |
TGFBR3 Antibody Blocking Peptide |
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CFPAC-1胰腺導(dǎo)管腺癌 |
綿羊原代卵巢顆粒細(xì)胞 |
CHST6 Antibody Blocking Peptide |
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B16-F10-Luc-GFP熒光素酶/GFP標(biāo)記的小鼠皮膚黑色素瘤細(xì)胞 |
小鼠原代zi宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞 |
HMGB1 Antibody Blocking Peptide |
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DU145-Luc熒光素酶標(biāo)記的人前列腺癌細(xì)胞 |
大鼠原代脾源性內(nèi)皮祖細(xì)胞 |
ANXA2R Antibody Blocking Peptide |
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RM-1-Luc熒光素酶標(biāo)記的小鼠前列腺癌細(xì)胞 |
大鼠原代卵泡膜細(xì)胞 |
ZCCHC4 Antibody Blocking Peptide |
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NHEK正常人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞 |
豬原代胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞 |
大鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞C1orf87 Antibody Blocking Peptide |