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公司所有產(chǎn)品均不得用于臨床診斷，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
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產(chǎn)品名稱 |
大鼠腎足細胞 |
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英文名稱 |
Rat renal podocyte |
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產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
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貨號 |
P-X1590 |
細胞介紹：
腎小球為血液過濾器，腎小球毛xi血管壁構成過濾膜。腎小球過濾膜從內(nèi)到外有三層結構：內(nèi)層為內(nèi)皮、中層為腎小球基膜、外層為上皮細胞層，上皮細胞又稱足細胞，其不規(guī)則突起稱足突，其間有許多狹小間隙，血液經(jīng)濾膜過濾后，濾液入腎小球囊。在正常情況下，血液中絕大部分蛋白質(zhì)不能濾過而保留于血液中，僅小分子物質(zhì)如尿素、葡萄糖、電解質(zhì)及某些小分子蛋白能濾過。
1)細胞來源于實驗動物正常腎臟組織。
我們推薦使用 Delf 原代腎足 細胞 培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
操作步驟如下：
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
注意事項：
1)原代培養(yǎng)的分離細胞在初次接觸體外環(huán)境時，雖然被分散成單個細胞，但它們之間的互相影響還是存在的， 而且這種影響對細胞能否存活是非常重要的。在這些細胞之間能產(chǎn)生一些促生長的活性物質(zhì)， 使細胞彼此互相促進存活和生長。如果接種的細胞密度過低， 細胞之間的促生長作用很小， 雖然營養(yǎng)物質(zhì)很充足， 也很難使細胞適應從體內(nèi)的組織環(huán)境到被分散后進入獨立生存環(huán)境的變化過程。 如果接種的細胞密度過大，會導致營養(yǎng)物質(zhì)供應不足， 代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代。
腎足細胞即腎小球上皮細胞，它附著于腎小球基底膜的外側，連同腎小球基底膜和腎小球基膜一起構成了腎小球血液濾過屏障。又由于正常成年機體的腎臟足細胞是一種終末分化細胞，體外培養(yǎng)的原代細胞不能增殖。
足細胞呈星型多突狀，胞體較大，由胞體伸出許多突起，呈指狀交叉覆蓋于腎小球基底膜外表面，并通過黏附分子和蛋白多糖分子與腎小球基底膜相連。足細胞在正常情況下可以分泌腎小球基底膜的主要組成成分 IV型膠原和纖維連接蛋白,在促腎纖維化引資等刺激下還能分泌具有降解腎小球基底膜作用的基質(zhì)金屬蛋白酶和組織蛋白酶，從而在腎小球基底膜的代謝平衡中發(fā)揮重要作用。
2)細胞鑒定：廣譜角蛋白（PCK）或WT-1（Wilm'sTumorProtein）免yi熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細jun、酵母和真jun。
5)細胞生長方式：不規(guī)則，含足突細胞，貼壁培養(yǎng)。
1、剪切組織：先將所取得的組織，用D-Hanks或Hanks液清洗，以去除表面血污，并用手術鑷去除黏附的結締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后，用手術刀將組織切成若干小塊，移入青霉素小瓶或小燒杯中，加入適量緩沖液，用彎頭眼科剪，反復剪切組織，直到組織成糊狀，約1mm3大小。靜置片刻后，用吸管吸去上層液體，加入適當?shù)木彌_液再清洗一次。
2、消化分離：消化分離的目的是將細小的組織塊消化分離成細胞團或分散的單個細胞，以利于進一步的培養(yǎng)，常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3、培養(yǎng)：細胞懸液用計數(shù)板進行細胞計數(shù)。用培養(yǎng)液將細胞數(shù)調(diào)整為（2～5）×105 cells／ml，或實驗所需密度，分裝于培養(yǎng)瓶中，使細胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內(nèi)，5％CO2，37℃靜置培養(yǎng)。一般3～5d，原代培養(yǎng)細胞可以黏附于瓶壁，并伸展開始生長，可補加原培養(yǎng)液量1／2的新培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)2～3d后換液，一般7～14d可以長滿瓶壁，進行傳代。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
2)原代培養(yǎng)時初始培養(yǎng)在組織分散和分離細胞時細胞可能會受到嚴重的損傷。適當增大原代培養(yǎng)接種的細胞密度， 給培養(yǎng)的細胞提供更多的類似于在體內(nèi)時細胞之間的相互作用， 會極大提高原代培養(yǎng)的細胞在體外存活率。待細胞適應體外環(huán)境后進行傳代培養(yǎng)時再以較低的密度接種和培養(yǎng)。
3)由于細胞之間的相互的內(nèi)在聯(lián)系被打破，分離細胞在體外培養(yǎng)時經(jīng)歷的生存環(huán)境改變很大，在體外存活和生長的難度相應增加。 對于貼壁依賴性細胞來說，盡快使接種的細胞貼壁，是決定培養(yǎng)能否成功的關鍵。可以在接種后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 3h 到 5h，由于細胞懸液中帶有少量培養(yǎng)液， 細胞即可以維持存活， 又可以很快接觸到培養(yǎng)瓶底壁， 是細胞迅速黏附于底物，待細胞貼壁后，再補足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
3、分離細胞培養(yǎng)法—懸浮型細胞培養(yǎng) 。
公司正在出售的產(chǎn)品：
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大鼠原代脾基質(zhì)細胞 |
大鼠腎上腺髓質(zhì)細胞 |
CNIH3/CNIH2 Antibody Blocking Peptide |
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人關節(jié)軟骨細胞 |
兔臍帶間充質(zhì)干細胞 |
HHATL Antibody Blocking Peptide |
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人黃韌帶成纖維細胞 |
兔腦微血管周細胞 |
Phospho-NMDAR1 (Ser896) Antibody Blocking Peptide |
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人zi宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞 |
人宮頸上皮細胞 |
CTNS Antibody Blocking Peptide |
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豬小腸黏膜上皮細胞 |
羊肺動脈內(nèi)皮細胞 |
FHOD3 Antibody Blocking Peptide |
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兔脂肪血管基質(zhì)細胞 |
小鼠腸間質(zhì)細胞 |
Neuroligin 3 Antibody Blocking Peptide |
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豬胃成纖維細胞 |
大鼠小腸成纖維細胞 |
phospho-AKT1 (Thr34) Antibody Blocking Peptide |
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小鼠肺動脈平滑肌細胞 |
人心臟微血管平滑肌細胞 |
GATA2 + GATA3 Antibody Blocking Peptide |
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人胰腺腺泡上皮細胞 |
兔小腸粘膜上皮細胞 |
KIF17 Antibody Blocking Peptide |
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大鼠棕色脂肪干細胞 |
人腎成纖維細胞 |
PRRSV-N protein Antibody Blocking Peptide |
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羊骨骼肌細胞 |
人乳腺成纖維細胞 |
Recombinant protein A / Gold |
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小鼠腎系膜成纖維細胞 |
大鼠主動脈弓內(nèi)皮細胞 |
C-Myc Antibody Blocking Peptide |
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人胃成纖維細胞 |
大鼠主動脈弓平滑肌細胞 |
SerpinB8 Antibody Blocking Peptide |
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人肝成纖維細胞 |
兔大隱靜脈內(nèi)皮細胞 |
Recombinant Cyn. monkey CD122 / IL2RB protein, C-His (HEK293) |
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兔腸神經(jīng)膠質(zhì)細胞 |
小鼠肝外膽管上皮細胞 |
大鼠腎足細胞EIF2D Antibody Blocking Peptide |