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公司所有產(chǎn)品均不得用于臨床診斷,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
產(chǎn)品名稱 |
大鼠牙齦成纖維細(xì)胞 |
英文名稱 |
Primary gingival fibroblasts from rats |
產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
貨號 |
P-X1742 |
操作步驟如下:
細(xì)胞介紹:
1) 細(xì)胞來源于動物的正常牙組織。
我們推薦使用 Delf原代 成纖維 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
視天氣狀況和運輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
注意事項:
1)原代培養(yǎng)的分離細(xì)胞在初次接觸體外環(huán)境時,雖然被分散成單個細(xì)胞,但它們之間的互相影響還是存在的, 而且這種影響對細(xì)胞能否存活是非常重要的。在這些細(xì)胞之間能產(chǎn)生一些促生長的活性物質(zhì), 使細(xì)胞彼此互相促進(jìn)存活和生長。如果接種的細(xì)胞密度過低, 細(xì)胞之間的促生長作用很小, 雖然營養(yǎng)物質(zhì)很充足, 也很難使細(xì)胞適應(yīng)從體內(nèi)的組織環(huán)境到被分散后進(jìn)入獨立生存環(huán)境的變化過程。 如果接種的細(xì)胞密度過大,會導(dǎo)致營養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)不足, 代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代。
公司正在出售的產(chǎn)品:
1、剪切組織:先將所取得的組織,用D-Hanks或Hanks液清洗,以去除表面血污,并用手術(shù)鑷去除黏附的結(jié)締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后,用手術(shù)刀將組織切成若干小塊,移入青霉素小瓶或小燒杯中,加入適量緩沖液,用彎頭眼科剪,反復(fù)剪切組織,直到組織成糊狀,約1mm3大小。靜置片刻后,用吸管吸去上層液體,加入適當(dāng)?shù)木彌_液再清洗一次。
2、消化分離:消化分離的目的是將細(xì)小的組織塊消化分離成細(xì)胞團或分散的單個細(xì)胞,以利于進(jìn)一步的培養(yǎng),常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3、培養(yǎng):細(xì)胞懸液用計數(shù)板進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。用培養(yǎng)液將細(xì)胞數(shù)調(diào)整為(2~5)×105 cells/ml,或?qū)嶒炈杳芏龋盅b于培養(yǎng)瓶中,使細(xì)胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內(nèi),5%CO2,37℃靜置培養(yǎng)。一般3~5d,原代培養(yǎng)細(xì)胞可以黏附于瓶壁,并伸展開始生長,可補加原培養(yǎng)液量1/2的新培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)2~3d后換液,一般7~14d可以長滿瓶壁,進(jìn)行傳代。
牙齦成纖維細(xì)胞是牙齦結(jié)締組織中的主要細(xì)胞,不僅具有活躍的自身更新能力,而且可合成膠原纖維、彈性纖維及機制,在牙周組織的保護和修復(fù)中起重要作用。
2) 細(xì)胞鑒定:纖維連接蛋白(Fibronectin)或波形蛋白(Vimentin)免yi熒光染色為陽性。
3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)jun、酵母和真jun。
5) 細(xì)胞生長方式:成纖維樣細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
2)原代培養(yǎng)時初始培養(yǎng)在組織分散和分離細(xì)胞時細(xì)胞可能會受到嚴(yán)重的損傷。適當(dāng)增大原代培養(yǎng)接種的細(xì)胞密度, 給培養(yǎng)的細(xì)胞提供更多的類似于在體內(nèi)時細(xì)胞之間的相互作用, 會極大提高原代培養(yǎng)的細(xì)胞在體外存活率。待細(xì)胞適應(yīng)體外環(huán)境后進(jìn)行傳代培養(yǎng)時再以較低的密度接種和培養(yǎng)。
3)由于細(xì)胞之間的相互的內(nèi)在聯(lián)系被打破,分離細(xì)胞在體外培養(yǎng)時經(jīng)歷的生存環(huán)境改變很大,在體外存活和生長的難度相應(yīng)增加。 對于貼壁依賴性細(xì)胞來說,盡快使接種的細(xì)胞貼壁,是決定培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵??梢栽诮臃N后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 3h 到 5h,由于細(xì)胞懸液中帶有少量培養(yǎng)液, 細(xì)胞即可以維持存活, 又可以很快接觸到培養(yǎng)瓶底壁, 是細(xì)胞迅速黏附于底物,待細(xì)胞貼壁后,再補足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
3、分離細(xì)胞培養(yǎng)法—懸浮型細(xì)胞培養(yǎng) 。
小鼠原代臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 |
Renca 小鼠腎癌細(xì)胞 |
NDST1 Antibody Blocking Peptide |
neuro-2a+luc小鼠腦神經(jīng)瘤細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 |
RGC-5小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞 |
phospho-A Raf (Ser214) Antibody Blocking Peptide |
NG108-15小鼠神經(jīng)細(xì)胞瘤與大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤之融合細(xì)胞 |
RM-1小鼠前列腺癌細(xì)胞 |
TRIM10 Antibody Blocking Peptide |
NIH/3T3小鼠胚胎細(xì)胞 |
RM-1+LUC小鼠前列腺癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 |
Claudin 2 Antibody Blocking Peptide |
OP9小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞 |
SDOW-17小鼠雜交瘤 |
phospho-KCNA3(Tyr135) Antibody Blocking Peptide |
OKT11小鼠雜交瘤(抗CD2)細(xì)胞 |
Sp2/0小鼠骨髓瘤細(xì)胞 |
KCNE1 Antibody Blocking Peptide |
P19小鼠畸胎瘤細(xì)胞 |
Sp2/0-Ag14小鼠骨髓瘤細(xì)胞 |
NCDN Antibody Blocking Peptide |
P388D1小鼠淋ba樣瘤細(xì)胞 |
STC-1小鼠小腸細(xì)胞 |
Rab3D Antibody Blocking Peptide |
P815小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞 |
U14小鼠zi宮頸癌細(xì)胞 |
25-OH Vitamin D3/BSA |
panc02小鼠胰腺癌細(xì)胞 |
TM4正常小鼠睪丸Sertoli細(xì)胞 |
NDUFB11 Antibody Blocking Peptide |
panc02+LUC小鼠胰腺癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 |
SV40-MES-13小鼠腎小球系膜細(xì)胞 |
NRBP2 Antibody Blocking Peptide |
PT-67小鼠源基于MLV-10A1逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞系 |
SVEC4-10小鼠淋ba結(jié)血管上皮樣細(xì)胞 |
TRAF2 Antibody Blocking Peptide |
RAG小鼠腎腺癌細(xì)胞 |
TC-1小鼠肺上皮細(xì)胞 |
ANGPTL4 Antibody Blocking Peptide |
RAW 264.7小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞 |
TCMK-1小鼠腎小管上皮細(xì)胞 |
C1orf43 Antibody Blocking Peptide |
RAW 264.7+GFP小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞+GFP |
TM3小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞 |
大鼠牙齦成纖維細(xì)胞TRGC2 Antibody Blocking Peptide |